耐塩性酵母candida versatilisの細胞膜atpaseの遺伝子.pptVIP

耐塩性酵母candida versatilisの細胞膜atpaseの遺伝子.ppt

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耐塩性酵母candida versatilisの細胞膜atpaseの遺伝子

Candida versatilis の degenerate RT-PCR 100bp Marker Sample 2000bp 1000bp 500bp Ca++ ATPase 解析予定 解析中 解析中 Cu+ ATPase H+ ATPase 酵母細胞膜のKとNaの取り込みと排出に関係する輸送系 pHin 6.8 pHout 3.0 Na+ PO43- Pho89p (Pi/Na+コトランス ポーター) Na+ Ena1p/Pmr2p(Na+ポンプ) ATP ATP H+ Pma1p (H+ポンプ) H+ K+ Trk1p/Trk2p (K+取り込み系) K+ K+ Duk1p/Tok1p (K+チャネル)        NscIp (陽イオンチャネル) H+ Na+ K+ Nha1p(Na+/H+アンチポーター) Original by H. Sychrova 耐塩性酵母Candida versatilisの細胞膜ATPaseの遺伝子解析 遺伝子名 Saccharomyces cerevisiae Zygosaccharomy-ces rouxii Candida versatilis Na+/H+ アンチポーター NHA1 ZrSOD2, ZrSOD22 CvNHA1 H+ポンプ PMA1 ZrPMA1 ? Na+(K+)ポンプ ENA1/PMR2 ZrENA1 ? Ca2+Mn2+ポンプ PMR1/SPF1 ? ? Cd2+Cu2+Fe2+ポンプ PCA1/CCC2 ? ? Mg2+(Al3+)ポンプ ALR1/ALR2 ? ? Zn2+ポンプ ZRT1/ZRT2 ? ? マルチドラッグポンプ PDR12/PDR5/YOR1 ? ? 味噌醤油諸味での微生物数の変動 Bacillus 細菌 耐塩性乳酸菌 好塩性乳酸菌 Zygosaccharomyces rouxii Candida versatilis 醤油諸味中の微生物菌叢の変化 日数 耐塩性乳酸菌や好塩性乳酸菌の 生育により諸味のpH低下 酸性を好む酵母生育 Z. rouxii 増殖 → 主発酵酵母 C. versatilis 増殖 → 後熟酵母 なぜ、2つの酵母種において増殖 時期が異なる? 酵母細胞での浸透圧調節 グリセロール C3 グリセロール C4 エリスリトール C5 アラビトール C6 マンニトール パン酵母?酒酵母 食塩 味噌?醤油酵母 (耐塩性酵母) 食塩 酵母細胞が希薄な水溶液に ある場合、細胞内に水が吸い 込まれ、浸透圧が生じるが、 表層に細胞壁があるので、 細胞はダメージを受けない。 酵母細胞が高濃度の塩分や 糖質を含む環境にある場合、 細胞内から水が流出し、生理 的応答がなければ、細胞壁 から細胞膜が外れる原形質 分離が生じる。また、細胞内 の物質が高濃度になり、代謝 環境が悪くなる。 酵母の場合、細胞外に塩分が 存在する場合、その濃度に 応答してグリセロールを合成、 蓄積して浸透圧差を中和する。 耐塩性酵母は、適合溶質の 合成能が強く、さらに高濃度で 蓄積できる。 酵母のホスホリパーゼB遺伝子 Saccharomyces cerevisiae PLB1, PLB2, PLB3, SPO1 (YMR008C, YMR006C, YOL011W, YNL012W) Torulaspora delbrueckii PLB1 Schizosaccharomyces pombe PLB1 Candida utilis PLB1 Kluyveromyces lactis PLB1 Zygosaccharomyces rouxii PLB1 Candida versatilis PLB1/PLB2 Candida albicans PLB1/PLB2 Glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchor Secreated enzymes Peptide motifes related to a catalytic function : SGGGXRA(M/L) : GLSG(G/S) : D(S/G)G(E/L)XXXN リン脂質分解酵素の反応様式 Phospholipases 酵母ホスホリパーゼBのアミノ酸アライメント 酵母?カビの PLBsの系統樹 グルタミン酸                  γ-アミノ酪酸(GABA)

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