自身免疫性肝病血清学检测分析.pptVIP

自免肝血清学实验室检测技术与临床意义 概述： 自身免疫性肝病是以肝脏为相对特异性免疫病理损伤器官的一类自身免疫性疾病，主要包括：自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBS)和原发性硬化性胆管炎(PSC)以及这三种疾病中任何两者之间的重叠综合征，常同时合并肝外免疫性疾病。其诊断主要依据特异性生化异常，自身抗体及干组织特征。 自身免疫性肝病 自身免疫性肝病发病情况（中国） 长期缺乏临床流行病学研究 病毒性肝炎高发国家 掩盖自免肝真实患者 临床对自免肝自身抗体检测 临床意义认识不足，开展不 普及，严重影响诊断、治疗 临床少见病 错误认识 AIH临床分类及特异性自身抗体 类型 相关抗体 靶抗原 I型 抗平滑肌抗体（ASMA） 抗核抗体（ANA） 抗肝可溶性/肝胰抗原抗体（SLA/LP) F-肌动蛋白 细胞核抗原 UGA-丝氨酰tRNA蛋白复合物 II型 抗肝肾微粒体1型抗体（LKM-1） 抗肝细胞溶质抗原1型抗体（LC-1) 细胞色素P450 IID6 亚胺甲基转移酶和环化脱氨酶 PBC相关自身抗体及抗原 荧光表现 相关抗体 对应靶抗原 胞浆颗粒型 抗线粒体抗体（2型常见） （AMA-2） 丙酮酸脱氢酶复合物 核点型 抗sp100抗体 sp100 核膜型 抗gp210抗体 抗Lamin蛋白及受体抗体 核孔复合体糖蛋白 Lamin蛋白及其受体 PBC主要为女性高发（男女比例为1:9），且年龄在50岁左右 90-95%患者可检测到AMA，而且抗体早于临床症状出现（50-60%患者通常无症状） 2-4年后，2/3患者开始出现明显临床表现 应用重组抗原检测AMA阳出现阳性时，事实上可以诊断为PBC或者至少可以提示该患者在5-10年内具有PBC发病的高风险 AMA与PBC诊断 N Engl J Med 2005;353:1261-73. IFA：多个基质组合 大鼠肝 大鼠肾 大鼠胃 肾实质 肾髓质 肝组织 胃组织 LIA：靶抗原确认实验 几乎涵盖所有自免肝相关抗体 每膜条对应一份样本 一次实验完成多个指标检测 结果稳定可靠 可肉眼判读，也借助软件实现数字化判读 微孔板ELISA 间接免疫荧光法（IFA）： 是检测自身免疫性肝病相关自身抗体的常规方法，结合多种不同组织基质的荧光表现，可区分多种不同的自身抗体，但该方法要求实验工作人员具有足够的荧光结果判读经验才能避免主观性和随意性，还有荧光设备的要求。 实验室方法学比较（一） 条带酶免分析法(LIA)： 多个抗原同时包被在一个膜条上，一次血清温育实现多个靶抗原的确认实验； 几乎涵盖了所有常见的自免肝相关抗体； 操作简单，易于判读； 每一膜条检测一份样本，最大限度降低试剂成本； 通过软件实现结果的数字判读和保存。 实验室方法学比较（二） 酶联免疫吸附法(ELISA)： 可特异性的开展靶抗原确认实验； 筛查产品在一个微孔中同时包被了6种抗原，一次实验可完成6种最常见的抗体筛查检测； 操作简单，可实现定量结果； 实验室方法学比较（三） 姓名 性别 年龄 科室 采样时间 检测项目 样本特点 病案号 申请医生 送检时间 项目编号 项目名称 结果 参考值 单位标识 1 AMA-2 阳性 阴性 2 LKM-1 阴性 阴性 3 LC-1 阴性 阴性 4 SLA/LP 阳性 阴性 5 sp100 阴性 阴性 6 gp210 阳性 阴性 7 Ro52 阴性 阴性 8 CENP 阴性 阴性 正确解读自免肝实验报告单 抗核抗体（ANA）：是AIH最常见的自身抗体，主要出现在Ⅰ型AIH中（阳性率75%），并且常与抗平滑肌抗体ASMA同时出现（85-90%）；ANA对AIH不具有诊断特异性，可见于多种结缔组织疾病和其它自身免疫性疾病。如果ANA与ASMA同时出现，则高度提示AIH。 抗平滑肌抗体（ASMA）：主要出现在Ⅰ型AIH中（阳性率40--90%），在AIH中，ASMA表现为高滴度（1:320），以IgG型为主，特异性靶抗原为F-肌动蛋白。 抗可溶性肝抗原/肝胰抗原（SLA/LP）抗体：是自身免疫性肝炎（AIH）最特异的诊断标志。虽然它的阳性率只有10-30%，但其阳性预告值几乎为100%。如果出现相应的临床症状，每一个阳性结果基本上可诊断AIH。 抗肝肾微粒体（LKM-1）抗体：已知的抗LKM抗体的靶抗原有3型（LKM-1 、LKM-2、 LKM-3）.其中LKM-1抗体为Ⅱ型AIH的标志，阳性率为7%，在儿童中的阳性率略高。 自免肝实验室检测意义（一） 抗肝细胞溶质抗原1型（LC-1）抗体：抗LC-