廖第一章蛋白质结构与功能概要.pptVIP

透析 （二）丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀 蛋白质沉淀方法：盐析法、有机溶剂法、重金属盐沉淀 法、加热变性沉淀法 盐析：是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质沉淀。 免疫沉淀法：利用特异抗体识别相应的抗原蛋白，并形成抗原抗体复合物的性质，可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。 （三）利用荷电性质可电泳分离蛋白质 电泳：在外电场的作用下，带电颗粒，将向着与其电性相 反的电极移动的现象。 几种重要的蛋白质电泳 *SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳：常用于蛋白质分子量的测定。 *等电聚焦电泳：通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。 *双向凝胶电泳：蛋白质组学研究的重要技术。 （四）应用相分配或亲和原理可将蛋白质进行层 析分离 蛋白质分离常用的层析方法 1.离子交换层析：利用各蛋白质的电荷量及性质不同进行分离。 2.凝胶过滤又称分子筛层析，利用各蛋白质分子大小不同分离。 （五）利用蛋白质颗粒沉降行为不同可进行超 速离心分离 * 超速离心法(ultracentrifugation)既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。 *蛋白质在离心场中的行为用沉降系数(sedimentation coefficient, S)表示,沉降系数与蛋白质的密度和形状相关 。 * 生物的化学组成、结构及生命过程中各种化学变化。生物化学是研究生命化学的科学 。 * 现了生物体主要由糖、脂、蛋白质和核酸四大类有机物质组成,并对生物体各种组成成分进行分离、纯化、结构测定、合成及理化性质的研究。动态生物化学：研究生物体内的物质变化 ，即代谢途径，确定了糖深根固酵解，TCA循环及脂肪分解等重要的分解代谢，对呼吸、光合作用等有了较深认识 20世纪50年代开始，以提出DNA的双螺旋结构模型为标志 * 蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。蛋白质（protein）是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命 。儿童会消瘦、发育迟缓。蛋白质参与骨骼和肌肉的生长，儿童的生长发育需要更多的蛋白质，若是缺乏对儿童的生长发育非常有影响。营养不良。许多人长期摄入的蛋白质过少会营养不良，常表现为面黄肌瘦。贫血。血红蛋白少，人体贫血。 * 解离方式取决于所处溶液的酸碱度 * 神经肽，在神经传导过程中起信号转导的作用，用于临床的镇痛治疗 * 在一级结构的基础上进行三维空间的折叠 * 每一种蛋白质都有一定的氨基酸种类，组成百分比，氨基酸排死顺序以及肽链空间的特定位置 * 0.127-0.149 * 二级结构的基础上分成一些特殊的结构比如说超二级结构 * 如果有些超二级结构有生物学功能，只有要超二级结构存在就有这样的功能，我们把这样的超二级结构叫模体。 * 完整的蛋白质的三级结构 * 介于二级结构与三级结构之间，模体和超级结构。二级结构与三级结构可以根据功能来分分为两大类一类是模体，一类是结构域 * 单一亚基没有生物学功能，完整的四级结构才能发挥生物学功能 * 不同生物学功能的蛋白质，含有不同的氨基酸序列。不同物种的蛋白质具有相同功能的蛋白质可能具有相似的氨基酸序列，同源性较近的物种，如果是相差太远的，则差异可能会很大 * 不同生物学功能的蛋白质，含有不同的氨基酸序列。不同物种的蛋白质具有相同功能的蛋白质可能具有相似的氨基酸序列，同源性较近的物种，如果是相差太远的，则差异可能会很大 * 均有血红素辅基 * 直角双曲线，S曲线，MB易氧结合，HB与氧结合分压较低时容易结合 * 有机溶剂、盐析法：脱去水化层。重金属盐：离水层。 将某一纯化蛋白质免疫动物可获得抗该蛋白的特异抗体。 * P、核酸 、核糖体，病毒等沉降系数在1-200 10-13 7 19 20 7 二、蛋白质的二级结构 定义 蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象。 主要的化学键： 氢键 主要形式： ?-螺旋 ( ? -helix ) ?-折叠 ( ?-pleated sheet ) ?-转角 ( ?-turn ) 无规卷曲 ( random coil ) C N O Ca C O N O Ca O 参与肽键的6个原子C?1、C、O、N、H、C?2位于同一平面，此同一平面上的6个原子构成了肽单元 。 肽单元 ?-螺旋 ?-折叠 无规卷曲：用来阐述没有确定规律性的那部分肽链结构 （明确而稳定结构）。 ?-转角和无规卷曲 Ca2：Pro 脯氨酸 猪