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【典例分析】 利用计数板可在显微镜下对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片,样品就滴在计数室内。计数室由25×16=400个小室组成,容纳液体的总体积为0.1 mm3。现将lmL酵母菌样品加99mL无菌水稀释,用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室,盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液。 ?现观察到图中所示a、b、c、d、e 5个大格80个小室内共有酵母菌440个,则上述ImL酵母菌样品中约有菌体__________个。为获得较为准确的数值,减少误差,你认为可采取的做法_____________________________。 【解析】因为每个小格的菌体数=440/80=5.5,体积是0.1mm3/400,所以单位体积酵母细胞=每小格平均菌体数×4×106×稀释倍数=5.5×4×106×100 =2.2×109个。可采用求平均值的方法获得较为准确的数值以减少误差。 完成实验 提出问题 作出假设 设计实验 分析结果,得出结论 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 该探究活动中涉及4个科学方法: (1)数学模型法; (2)抽样检测法; (3)显微观察法; (4)微生物培养法。 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。 计数时,常采用抽样检测。 计数器大方格规格: 2mm×2mm×0.1mm 或1mm×1mm×0.1mm 25×16型的计数板 深度 大方格规格1mm×1mm×0.1mm 400小格 25×16 25×16型的计数板 关于血球计数板的计数方法: 先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻,待细菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。每个小方格内含有细胞数不宜超过10个。 25个中格 16个小格 16个中格 25个小格 25X16 = 400小格 16X25 = 400小格 每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3 * * * * * * * * * 抽样检测: 5×16=80个小格 抽样检测: 4×25=100个小格 酵母菌的计数 显微计数:对于压在小方格上的酵母菌应取相邻两边 及顶角计数。(计上不计下,记左不计右) 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数 注意事项: 进行计数前,应先将试管摇匀,目的是使酵母菌在培养液中混合均匀,以减少计数误差。 显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应取相邻两边及顶角计数。 若一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清时,则可将培养液稀释一定倍数后再计数。 本实验无对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。 本实验不用做重复实验, 每次统计时取3次,取平均值即可。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 结果分析 构建数学模型: 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 实验再探究 温度、营养物质影响酵母菌的生长吗?某同学按下表完成了有关实验。 试管 编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃) A 10 — 0.1 28 B 10 — 0.1 5 C — 10 0.1 28 温度、营养物质对酵母菌生长的影响 试管 编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃) A 10 — 0.1 28 B 10 — 0.1 5 C — 10 0.1 28 实验再探究 培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗? 例:(2008年江苏卷31题)为研究酵母菌种群密度的动态变化,某同学按下表所列条件进行了A、B、C和D 共4组实验,用1000mL锥形瓶作为培养器皿,棉塞封口,在25℃下静置培养,其他实验条件均相同,定时用血球计数板计数。根据实验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。 (2)B组和A组的实验结果不同的原因是B组____________。 (3)D组和B组的实验结果不同的原因是D组____________。 (4)在整个实验过程中,直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的,正确的方法是 和 。 (5)实验结束后,用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的,正确的方法是 。 〖答案〗 (1)B??A??D?? (2)培养液较多,与空气接触面积较小,故供氧较少 (3)葡萄糖浓度较低,故营养物供应较少 (4)摇匀培养液后再取样 培养后期的样液稀释后再计数 (5)浸泡和冲洗
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