第二章1蛋白质化学要点分析.pptVIP

离子交换树脂分离氨基酸主要基于： ⑴. 氨基酸的带电情况 （与树脂电离基团之间的静电作用） ⑵. 氨基酸的R基团非极性大小 （与树脂非极性苯环的疏水作用） 也可以用电泳、PI分离 第三节 一、肽的概念 1、结构与命名-----肽是氨基酸链 氨基酸通过肽键连接形成的链状化合物称为肽 （结构与命名） 2、肽与氨基酸的区别 相同点：均含有α-COOH，α-NH2； 不同点：（1）肽中α-COOH，α-NH2的距离比氨基酸大，可离子化程度较低。一般肽链越大，可离子化程度越低。（2）肽中N端的α-NH2的PK比游离氨基酸小，而C端的α-COOH的PK比游离氨基酸大，R基的PK在两者之间。 二、生物活性肽 1、谷胱甘肽----参与氧化还原反应 —SH（还原型）可形成-S-S-（氧化型） 谷胱甘肽（GSH）是活细胞的重要组成成分，活性的SH极易被氧化（变成GSSG），在生物氧化，-SH保护，酶活性和氨基酸运输中具有重要作用。 2、其它肽 三、氨基酸的理化性质 （一）、物理性质∶ 约在200-300℃在加热到熔点时往往同时分解生成胺，并放出CO2气体（为什么？） （二）氨基酸的旋光性（ rotation） 从α-氨基酸的结构通式可以看出，除R基为氢原子外，即除甘氨酸外，均含有不对称碳原子，其上四个取代基在空间的排列可以有两种不同的方式，即L型和D型，它们彼此是一种不能叠合的物体与镜象关系或左右手关系，分子的这两种形式称为光学异构体（optical isomers）、对映体(enantiomers)或立体异构体（stereoisomers）。 [α] Dt为旋光率 L为旋光管的长度，单位为分米； C为溶液浓度，即100ml溶液中所含溶质的克数 αDt是在钠灯（D线，λ＝589.6或589.0nm）为光源，温度为t，管长为L，浓度为C时所测得的旋光度。 注意旋光率（比旋光度）不等于旋光度。 一个旋光化合物的旋光性可以用旋光率[α] Dt（或称比旋光度）来表示，它是α-氨某酸的物理常数之一，是鉴别各种氨基酸的一种根据。 如何用它鉴别和测定AA含量？ pH对L-亮氨酸（Ⅰ）和L-组氨酸（II）的[α]25℃D值的影响 氨基酸的旋光符号和大小取决于它的R基性质，并且与测定的溶液pH有关。 4 吸光性∶ 所有的氨基酸在可见光范围内均无吸收，只有下列氨基酸在近紫外有吸收。 Tyr : ?max=275nm Trp : ?max=280nm Phe : ?max=259nm 2、氨基酸的两性解离及等电点 氨基酸晶体具有很高的熔点，一般在200℃以上。 例如甘氨酸在233℃熔解并分解，酪氨酸的熔点更高（340℃），但是普通的有机化合物如二苯胺熔点为53℃。 此外，还发现氨基酸能使水的介电常数增高，而一般的有机化合物如乙醇、丙酮等却使水的介电常数降低。 推测：氨基酸在晶体或水中主要是以兼性离子(zwittterion)亦称偶极离子(dipolarion)的形式存在，不带电荷的中性分子为数极少。 氨基酸的两性解离 非离子形式（两性化合物） 两性离子形式 Amino Acids Have Characteristic Titration Curves 甘氨酸的滴定曲线 从两性离子开始滴，当滴到PK1时说明什么（即PH=PK1时）？ 即有一半的正离子被滴定。 氨基酸的滴定曲线 (1)反映在不同的pH条件下，AA的带电状态、两性解离及等电点。 (2) 计算出氨基和羧基的解离常数∶ pH=pK + lg[质子受体]/[质子供体] 所以：pH=pK + lg[质子受体]/[质子供体] 氨基酸（AA）溶液在某一pH时，AA的氨基和羧基的解离度完全相同，此时，AA分子所带的正、负电荷相等，即AA分子的净电荷为零，它在电场中既不向阳极移动，也不向阴极移动，此时，AA溶液所处的pH就称为该AA的等电点(Isoelectric point，用pI表示)。 氨基酸的等电点Isoelectric point of Amino Acids pI is the pH of an aqueous solution of an amino acid at which the molecules on average have no net charge. The titration curve of 0.1 M glycine, centered about pK1 = 2.34 and pK2 = 9.60. pI = (pK1 + pK2 )/2 R-CH-COOH k1 R-CH-COO-