用于美容护肤的干细胞分泌因子的制备方法重点解读.docVIP

公开号 CN101461772 A 发布类型 申请 专利申请号 CN 200910067634 公开日 2009年6月24日 申请日期 2009年1月7日 优先权日 2009年1月7日 公开号 200910067634.8, CN 101461772 A, CN 101461772A, CN 200910067634, CN-A-101461772, CN101461772 A, CN101461772A, CN200910067634, CN200910067634.8 发明者 李文忠, 欧来良 申请人 天津欧瑞生物科技有限公司 导出引文 BiBTeX, EndNote, RefMan 被以下专利引用 (1), 分类 (2), 法律事件 (3) 外部链接:? 中国国家知识产权局, 欧洲专利数据库 (Espacenet) 用于美容护肤的干细胞分泌因子的制备方法CN 101461772 A 摘要 本发明涉及一种可用于美容、护肤的干细胞分泌因子的制备方法。包括细胞分离、干细胞的扩增、干细胞因子体系的获取和浓缩、贮存得到含有干细胞活性因子体系。该体系包括目前已鉴定的各型干细胞所分泌的活性因子。本发明所得的干细胞活性因子体系中不含外来的培养液成分，也不含有死细胞裂解成分。并可以长期保存而维持组织和细胞修复活性。使干细胞美容真正从理想走向了现实。在生物医学的深度对传统美学观念进行了提升。同时该发明简单易行，适宜于大规模生产，为干细胞服务于美丽事业提供了一条捷径。 权利要求(6) 1、一种用于美容护肤的干细胞分泌因子的制备方法，其特征在于包括的步骤：1)分离干细胞：从人或哺乳动物相应组织中分离出干细胞；2)干细胞的扩增，用相应干细胞的常规培养方法，包括a-MEM培养基，加入10％的胎牛血清，5％CO2，37℃条件下培养，定期换液，传代，进而得到所需数量的干细胞；3)干细胞因子体系的获取：在干细胞分裂最旺盛的时期，弃去正常培养基，用PBS缓冲液(磷酸缓冲液，pH＝7.4左右)清洗1-3次，然后加入PBS或生理盐水，细胞培养箱中培养4-24小时，收集上清液，即可得到富含干细胞生长因子体系的溶液；4)浓缩、贮存：所得液体离心，除去散落细胞，浓缩，按1×106个细胞/毫升的浓度进行浓缩，得产品，可于-20℃长期保存，以备使用。 2、 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的来源于干细胞所分泌的干细胞 因子体系，该体系包括该体系包括干细胞因子、内皮细胞生长因子、表皮细胞生长因子、 肿瘤坏死因子肝细胞生长因子、神经生长因子、纤维母细胞生长因子、胰岛素样成长因 子、粒细胞集落刺激因子、白细胞介素；此外，干细胞分泌因子中还含各型胶原蛋白， 包括I、 II、 III、 IV型胶原蛋白，以及各种溶菌酶。 3、 根据 权利要求1所述的方法，其特征在于所述的千细胞因子体系是指：来源于 人或哺乳动物胚胎干细胞、脐血干细胞、骨髓千细胞、表皮干细胞、内皮干细胞、外周 血干细胞、脂肪干细胞，也可泛指所有的干细胞。 4、 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所得的产品作为活性成分配以医学上 接受的溶解液构成组合物的产品，直接用于美容、护肤，包括、美容、祛斑、修复疤痕。 5、 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所得的产品作为活性成分可以添加到 各种制剂的美容护肤产品中，包括除皱、美容、祛斑、修复疤痕。 6、 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所得的产品用于美容、护肤产品中的 针剂、面霜、乳液、水液制剂，包括清洁霜、清洁乳、清洁皂、面膜、化妆水、按摩膏、 乳液、营养霜、关容霜、粉底或粉饼。 说明 用于美容护肤的干细胞分泌因子的制备方法 技术领域 本发明涉及一种可用于美容、护肤的干细胞分泌因子的制备方法。该干细胞分泌的 复合因子，可被应用于美容化妆品、保健品、护肤品。 背景技术 干细胞是一种具有多向分化潜能的细胞，根据来源的不同可以分为胚胎干细胞和成 体干细胞。胚胎干细胞可以分化为身体的任何一种细胞，所以也叫全能干细胞。成体干 细胞是指那些具有组织或器官特异性的干细胞，能在适宜的环境中分化成与其定位相宜 的细胞系，又称为多能干细胞。干细胞在特定的环境中可以定向分化，从而达到修复组织 和细胞损伤的作用。本发明者研究表明（Bcl-2 engineered MSCs inhibited apoptosis and improved heart function, Stem Cells, 2007 Aug;25(8):2118- 27..)干细胞可以通过分化为特 定的细胞来修复组织，而旁分泌作用在组织的修复中发挥了更大的作用。也就是说，在 千细胞治疗组织损伤的时候，干细胞分泌的细胞因子发挥了极为重要的作用。该体系包 括干细胞因子（SCF)、内皮细胞生长因子（VEGF)、表皮细