仔猪黄白痢的综合防治论文重点解读.doc

仔猪黄白痢的综合防治 (义和乡畜牧兽医站 肖安云) 摘要：随着养猪业的飞跃发展和饲养方式以及规模的改变，使得猪病的种类和范围也相应扩大，疫情日益复杂。由于种种原因仔猪黄白痢几乎出现在每个猪场，而且同窝猪患病可达90%左右，且黄痢死亡严重。目前国内外对黄白痢的防治主要使用抗生素，化学药物，这些药物的大量使用使很多病原菌产生了耐药菌株。同时，药物残留造成人体伤害，因此这也成为食品卫生亟待解决的问题。而中药系天然药物，具有毒副作用小和不易产生耐药性等优点。同时中药在治疗方面取得了较好的治疗效果。因而用中药防治仔猪黄白痢越来越受到人们的重视。本次实验主要通过中药对患病仔猪进行治疗，观察疗效，并结合各种现代防治措施，提出切实可行的对于仔猪黄白痢的综合防治方案。 关键词：中药制剂 肠粘膜修复 1.实验室阶段 1.1 实验材料 1.1-1 实验药物 中药制剂由白头翁、黄柏、连翘、秦皮、蒲公英、大青叶、白芍、白术、苍术、陈皮、茯苓、地榆、石榴皮等十三味中药组成。 1.1-2 实验群体 四川不同地区的三个猪场，临床表现为不同程度仔猪黄白207头。 1.1-3 供试细菌 猪大肠杆菌、沙门氏菌，均为临床病猪粪便中分离所得 1.1-34实验仪器 普通培养箱、电子天平、解剖器械、高压灭菌锅、光学显微镜、微量加样器、超净工作台 1.2 供试药品的制备 1.2-1 供试中药的制备 将中药按配方剂量置于65℃烘箱中烘干，粉碎为细末，过40目筛，混合均匀，分装后存放于通风干燥处备用。中药试剂水煎剂制备：参照李仪奎的方法制备。操作：取中药试剂300克，加1000毫升蒸馏水浸泡24小时，煮沸30分钟，过滤；药渣加3——5倍蒸馏水继续煎煮，煮沸30分钟过滤，再将药渣按上述方法煎煮一次，过滤。合并三次滤液，于水浴中浓缩成每毫升含药1克，分装于100毫升玻璃瓶备用，用橡皮塞封口。 1.2-2 培养基的制备 表1 LB液体培养基的成分及含量 成分 蛋白胨 酵母提取物 NaCl 双蒸水 用量 10g 5g 10g 1000ml 将上述成分混合于1000ml水中，加热溶解调pH7.1~7.3，121℃灭菌15min。37℃培养箱过夜，无菌则放入4℃冰箱备用。 表2 伊红美蓝培养基的成分及含量 成分 蛋白胨 乳糖 磷酸氢二钾 琼脂 伊红 美蓝 水 用量 10g 10g 2g 13g 0.4g 0.065g 1000ml 除伊红和美蓝外，将其余成分混合于1000ml水中，加热溶解调pH7.1~7.3，121℃灭菌15min，分别加入2%的伊红水溶液20ml和0.5%的美蓝13ml。待冷却至60℃左右时，倒平板。37℃培养箱过夜，无菌则放入4℃备用。 1.2-3药敏纸片的制备 参照沈关心等的方法制备[1]。操作：选用质量较好的滤纸，用打孔器制成6.35mm的圆纸片，每100片分装于一个干净的带塞小瓶内121℃高压蒸汽灭菌30min。再经60℃~100℃烘干将灭菌的干燥纸片，在临用前浸泡一定浓度的待测抗菌药液中，使纸片均匀地吸取药液，置冰箱内浸泡30~60min。放入37℃的温箱内2~3h烘干。制备好的干燥药敏纸片分装在密封小瓶内放在干燥器中低温保存备用。 1.3 方法 1.3-1 病料采样 选取病猪粪便为样品，用预先处理的干净塑料袋直接快速接取新鲜粪便，密封立即带回实验室做细菌分离培养备用。 1.3-2 病原分离培养 电子天平称取粪便1g放入装有99ml无菌水并放有小玻珠的250ml三角瓶中，用振荡器搅拌30min，使微生物分散，静置约30s，用无菌微量加样器吸取10μl菌液对号接种在伊红美蓝培养基上，在温箱中培养36h。伊红美蓝培养基上长出具有金属光泽和黑色的圆形菌落，经鉴定为大肠杆菌以及猪沙门氏杆菌。分别勾取单个大肠杆菌和沙门氏杆菌接种于10ml无菌LB液体培养基中，振荡培养24h后即成菌液。并用小白鼠做动物回归实验，确定菌落的致病性 1.3-3 纸片琼脂扩散法 将纯化供试细菌菌液用涂布法接种于药敏培养基，置室温干燥3~5min待平皿面稍干后用无菌镊子将含药纸片平放于含菌琼脂平板表面，每种药液重复3次。将培养基放入37℃温箱中24h。 1.3-4药敏试验 用纸片法并根据抑菌圈直径大小分别测定复方中药，庆大霉素，四环素，痢菌净，磺胺，新，IV对腹泻病猪分离优势（致病）菌的抑菌效果。结果判定：抑菌圈直径大于15mm为高度敏感；10~15mm为中度敏感；小于10mm为耐药[2]。 1.3-5 复方中药对患病仔猪的治疗试验 对患病仔猪采取灌服给药的方式进行治疗。疗效判定：用药3日后粪便成形，色泽正常为痊愈；减轻为好转；为减轻或加重为无效。 2.结果与分析 2.1药敏实验结果（见表3） 表3 几种常用药物对病猪分离优势致病菌