第三章培养基制备说明.pptVIP

第三章　培养基制备 知识目标 1.掌握培养基的常见原材料； 2.掌握淀粉水解糖的制备方法； 3.掌握培养基的灭菌方法。 能力目标 1.能够根据生产要求选择合适培养基； 2.在生产中，能根据企业现状选择合适的培养基灭菌方法。 第一节工业发酵培养基 一、培养基的营养成分及用途 光 光能自养 自养菌 氢、硫、氨 化能自养 1.能源 亚硝酸盐、亚铁盐 碳水化合物等有机物 石油天然气和石油化工产品（如醋酸）异养菌 功能：生长、繁殖需要 碳酸盐 2.碳源 淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等 石油、正构石蜡、天然气 醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品 功能：提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础 有机氮：黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆、蛋白胨、 3.氮源 酵母粉、鱼粉、发酵菌丝体、酒糟水等 无机氮： 尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐 功能：构成菌体、含氮代谢物； 磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐 4.无机盐 铁、锰、钴等微量元素 功能：构成菌体，参与酶的组成，维持酶活性，调节渗透 压，调节pH值，维持氧化还原电位； 5.生长因子 硫胺素、生物素、对氨基苯甲酸、肌醇等 功能：酶的辅助部分 6．前体、促进剂与抑制剂 发酵培养基中某些成分的加入有利于调节产物的形成，而并不促进微生物的生长，这些物质包括前体、促进剂和抑制剂。 （1）前体 指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，而其自身的结构没有多大的变化，但产物的产量却因加入前体而有较大的提高。 如：在青霉素生产中加入玉米浆，青霉素产量可从20u/mL增加到100u/mL，研究发现玉米浆中的苯乙胺被有限结合到青霉素分子中，从而提高了青霉素G的产量。 （2）促进剂 指那些既不是营养物又不是前体，但却能提高产量的添加剂。 比如在酶制剂发酵过程中，加入诱导物、表面活性剂及其它一些产酶促进剂（比如吐温80、植酸、洗衣粉等） （3）抑制剂 在发酵过程中加入抑制剂会抑制某些代谢途径的进行，同时会使另外一些代谢途径活跃，从而获得人们所需要的某种产物。 例如：微生物发酵生产甘油中，例如亚硫酸氢钠，它与代谢过程中的乙醛生成加成物。 α-磷酸甘油的合成 糖原→1-P-葡萄糖→6-P葡萄糖→EMP途径→6-P-果糖 ? 磷酸酶 α-磷酸甘油脱氢酶 ? 甘油 ←←←α-磷酸甘油←←←←←←磷酸二羟丙酮 NAD+ NADHH+ ↑ 3-磷酸甘油醛 丙酮酸羧化支路 ↑ 丙酮酸→→→→→→→磷酸烯醇式丙酮酸 ↑ 丙氨酸 7.水分 功能：生化反应均在水溶液中进行 第二节 培养基的类型及选择 1.依营养物质的来源分类 天然培养基； 合成培养基：也称组合培养基（多用于定量研究）； 半合成培养基：（用的最多，在部分天然有机碳源、氮源、生长因子的基础上，适当加入一些化学药品）； 2.依培养基的物理状态来分： （1）固体培养基 A、凝固培养基 ：即遇热可融化，冷却后则凝固的固体培养基。 B、天然固体培养基：由天然固体状基质直接制成的培养基，如麸皮，米糠，木屑等。 （2）半固体培养基 加入0.5%左右的琼脂作为凝固剂，形成的培养基称之半固体培养基。 主要用于菌种鉴定，观察细菌运动特征及噬菌体的效价测定等。 （3）液体培养基； 培养基中80～90%是水。 3.依培养基的用