基因的操作程序概述.ppt

一、目的基因的获取 1、目的基因： * 基因工程的基本操作程序 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 （1）从基因文库中获取目的基因； （2）利用PCR技术扩增目的基因； （3）通过DNA合成仪用化学方法直接合成 主要指的是编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子。 2、获取方法： 获得目的基因的方法 （一）从基因文库中获取目的基因 1.什么是基因文库？种类有哪些？ 种类： 基因组文库： 部分基因文库： （如cDNA文库） 含有一种生物的全部基因 含有一种生物的部分基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 2）利用PCR技术扩增目的基因 PCR——多聚酶链式反应 是一项生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术，可在短时间获取大量的目的基因。 PCR技术 原理： 前提： 条件 方式 PCR扩增仪 DNA复制 一段已知目的基因的核苷酸序列 ：以_____方式扩增， 即____（n为扩增循环的次数） 指数 2n 模板、引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶等 过程 变性：加热至90～95℃双链DNA解链成为单链DNA 退火：冷却至55～60℃部分引物与模板的单链DNA的