1细胞培养:从活的机体中取出组织或细胞,分散成单个细胞,模拟机体内的生长条件,在体外建立无菌、适温和一定营养条件等,使其在体外环境中继续生长繁殖的过程,并维持其结构和功能的技术。
2净化工作间设计标准为万级
3消毒:杀死病原微生物,但不一定能杀死细菌芽孢的方法,通常用化学的方法来达到消毒的作用,用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
4灭菌:把物理上所有的微生物全部杀死的方法,通常用物理的方法来到达灭菌的目的。
5贴壁依赖型细胞分为4型:成纤维细胞型、上皮细胞型、游走细胞型、多型细胞型
6传代培养:体外生长的培养细胞受营养条件、生长空间等因素的限制,当细胞增殖达到一定密度后,则需要分离出一部分细胞和更新培养液进行扩大培养的过程。
7细胞活力:活细胞占总细胞的百分比
8冻存和复苏的原则:慢冻快融
9细胞冻存常用保护剂为DMSO,它是一种渗透性保护剂
10细胞污染和检测方法:肉眼直接观察法、培养检查法、显微镜观察法、PCR检测
11支原体污染的处理:用MRA处理细胞、清洗纯化法、药物辅助加温处理、使用支原体特异性血清
12原代培养:从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,完成了从体内环境到体外环境的过渡和适应过程,恢复了分裂增殖和生长发育的能力
13实体组织形成细胞悬液的方法:机械分散法、消化分离法(上皮细胞和肝细胞)、贴块培养法(血管平滑肌细胞)
14悬浮细胞分离方法(淋巴细胞):密度梯度离
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