1、全血细胞计数.docVIP

大庆油田总医院集团乘风医院检验科 质量手册 1. 全血细胞分析（血常规）检测 第1页、共13页 第 1 版、第3次修订 规程编写：戴涛 日期：2006-6-2 附件3：SOP文件、临检 审核：王崇波 日期：2011-3-30 1.仪器检测原理 定量地吸取血液取样，按规定的倍率稀释后，被送入各检测器容器，在检测容器中，有孔眼状细孔，在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在稀释试样中的血球，通过细孔时，电极之间的直流电阻将发生变化。根据直流电阻的变化血球的大小作为电脉冲被检测出来。根据电脉冲的个数，可算出血球数。另外，可通过求该脉冲大小，就可按血球的大小描出粒度分布，并且，通过解析粒度分布，可得到各种解析数据。 WBC、HGB检测原理 （1）全血模式： 1) 血液通过吸液管被吸入旋转阀； 2) 由旋转阀定量的6μL的血液，用稀释液1.994ML被移送到WBC检测器的同时，添加WBC／HGB溶血剂1.0ML，成1∶500的稀释试样。这个状态下约使其反应10秒后，在白细胞膜保持原来的状态下，红细胞发生溶血，血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。 3) WBC检测器中的被稀释／溶血后的试样中，约1ML被移送到HGB检测器。 4) WBC检测器中的试样，通过细孔被吸引500μL，这时，根据PC检测法，对血球通过细孔时的脉冲数进行计数。 5) 在HGB测量器中，由发光二极管照射波长为555NM的光，能照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光率的测量，与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光率相比较，以求出HGB（血红蛋白值）。 （2）稀释模式： 1) 事先用清洗液稀释成1∶26的血液试样，通过吸液管被吸入旋转阀。 2) 由旋转阀定量的78μL稀释血液，用稀释液1.922ML被送到WBC检测器的同时，添加WBC／HGB溶血剂1.0ML，成1∶1000的稀释试样。这个状态下约使其反应溶血，血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。 3）WBC检测器中的被稀释溶血后的试样中，约1ML被移送到HGB检测器。 4）WBC检测器中的试样，通过细孔吸引500μL，这时，根据DC检测法， 对 血球通过细孔时的脉冲数进行计数。 5）在HGB测量器中，由发光二极管照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光度被测量，与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光度相比较，以求出HGB（血红蛋白值）。 大庆油田总医院集团乘风医院检验科 质量手册 1. 全血细胞分析（血常规）检测 第2页、共13页 第 1 版、第3次修订 规程编写：戴涛 日期：2006-6-2 附件3：SOP文件、临检 审核：王崇波 日期：2011-3-30 1.2RBC、PLT测量原理 （1）全血模式： 1）血液通过吸液管被吸入旋转阀。 2）由旋转阀定量4.0μL血液，用稀释液1.996ML稀释成1∶500，作为稀释试样被移送到搅拌容器。（第一次稀释）。 3）接着，被稀释成1∶500的试样用旋转阀定量40μL，用稀释液1.960μL稀释成1∶25000，被移送到RBC/PLT检测器。（第二次稀释） 4）RBC／PLT检测器中的试样，通过细孔被吸取250μL。同时，RBC及PLT由DC检测法被计数。同时，HCT（红细胞比积），由红细胞脉波峰值检测法来求出。 （2）稀释模式： 1）用清洗液事先稀释1∶26的血液试样，用吸液管吸入旋转阀。 2）旋转阀定量2.08μL的稀释血液，用1.99792ML的稀释液被移到RBC／PLT检测器，稀释成1∶25000的稀释试样。 3）RBC/PLT检测器中的试样，通过细孔被吸引250μL，同时RBC及PLT根据DC检测法来计数。同时，HCT（红细胞比积值）根据红细胞脉冲波峰值检测法求出。 1.3 红细胞计算 红细胞常数（红细胞平均体积，红细胞平均血红蛋白量，红细胞平均血红蛋白浓度）根据RBC、HGB及HCT来求出。 细胞平均体积（MCV） 根据RBC及HCT，由下式来求出。 MCV（fL）＝HCT（%）／RBC（×106／μL）×10 （2）红细胞平均血红蛋白量（MCH） 根据RBC及HGB，由下式来求出。 MCH（pg）＝HGB（g/dL）／RBC（106／μL）×10 胞平均血红蛋白浓度（MCHC）根据HCT及HGB，由下式来求出。 MCHC（g/dL）＝HGB（g/dL）／HCT（%）×100 1.4 WBC的分类原理 （1）WBC粒度分布，采用4条辨别线划分3个区域，来辨别小型白细胞，中型白细胞，大型白细胞，低辨别线（LD）在30至60fL之间的最合适位置上自动决定，高鉴别线（UD）固定在300fL，用作粒度分布的