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第二章 名词 染色体步行：先确定某一特定基因的基点，通过PCR或其他区域的定位的方法测定相邻的基因逐渐将染色体全部定位的方法称为染色体步行 FISH：将基因组DNA变性成单链固定在膜上DNA或特定片段的DNA（放射性标记）作为探针与染色进行杂交，经放射自显影确定基因所在的染色体区段，这种方法称为FISH 定位克隆：功能的基因经PCR扩增定位确定其功能称为定位克隆 RFLP：物种用特定的限制酶进行切割在进行电泳进行比较，以比较有他们在进化上的差别 RAPD: 随机扩增多态性DNA技术一种限制酶对整个基因组进行切割，将收集到的DNA片段进行且扩增，分别鉴定各区段所占的位置的技术称为随机扩增多态性DNA技术 AFLP：扩增片段长度多态性， STS：序列标签位点，将一段已知碱基序列的DNA为探针与基因组进行杂交测定其位置 ＳＳＲSNP：用一个标定的核苷酸为探针对整个基因组进行联会测定 EST：表达序列标签， 基因定位有哪些水平？ mu为单位 染色体定位：利用同线法、缺失法、单体法、三体法把基因定位到特定的染色体上。细胞水平上的基因图又称细胞遗传图 区域定位：利用染色体步行、FISH和基因克隆等方法从细胞遗传学水平，将基因定位到染色体的具体区带。 分子定位：利用分子标记、DNA芯片技术，将基因确切定位在DNA上的具体位置上 3 利用交换率进行基因定位的方法有哪些？ . 中断杂交作图. 2. 基因重组作图 3. 转化基因定位 4. 转导基因定位 5. 性导基因定位 4 染色体定位的方法有哪些？ 5 什么是分子标记，有哪些意义，主要有哪些？ （1） 基于杂交的分子标记：RFLP标记，小卫星DNA标记（SSR） （2）基于PCR的分子标记：①单引物PCR标记，如RAPD、ISSR标记；②双引物PCR标记，如AFLP标记；③双引物特异PCR标记，如SSR标记 （3） 其他一些新型分子标记：如SNP标记、STS标记、EST标记 意义：①基因组作图和基因定位 ②克隆特定基因 ④用于疾病诊断和遗传病连锁分析 在顺式排列中如果互补的话则说明两个突变不在同一个区域内，如果不互补梁突变在你同一区域内。 7什么是基因芯片技术，基本步骤，在哪些方面有运用？ 将数以万计的DNA探针固化于支持物表面上，产生二维DNA探针阵列，然后与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号来实现对生物样品快速、并行、高效地检测或医学诊断的技术成为基因芯片技术。 1. 芯片制备 （1）支持物的预处理：支持物(硅芯片、玻片或瓷片) 预处理，使其表面衍生出羟基、氨基活性基团。 （2）DNA芯片阵列的制备：将制备的基因探针（已克隆的基因片段PCR或人工合成的DNA片段）、打印（喷墨打印或针式打印） 2. 准备样品: 分离纯化cDNA , mRNA→扩增→标记(荧光、生物素、放射性标记） 3.分子杂交 样品与DNA芯片上的探针阵列进行杂交(30min) 4. 检测分析 软件进行进行图象分析和数据处理 运用：1. DNA 2. 基因表达分析 3. 基因组研究：作图、测序、基因鉴定、基因功能分析 4. 基因诊断：寻找和检测与疾病相关的基因 8推论题 SECTION1 一：名词 组成型突变：操纵基因突变后，不允许阻遏蛋白与该区域结合，结构基因开放 超阻遏突变：调节基因突变后，产生的阻遏蛋白不被任何的诱导物所诱导，能始终结合与操纵基因上，使结构基因关闭。 结构基因： 调节基因： 持家基因： 奢侈基因：表达后不会再关闭 断裂基因：含有内含子的基因 启动子：能与核糖体识别结合并启动基因转录的一段核苷酸序列 增强子：某段序列含有72碱基的两重复，位于结构基因前段或后端，无组织或细胞特异性，能促进结构基因的转录。 沉默子：某段ＤＮＡ序列，位于操纵子前或后，促进DNA的螺旋，使结构基因关闭。 操纵基因 假基因：由成熟的mRNA反转录出cDNA，环化后插入到DNA序列内，不执行特定功能的基因。 融合基因：把特定的目的基因与乳糖操纵子结合，可快速合成特定基因产物，这种结构成为融合基因 拟等位基因：染色体上两个结构类似，功能相关紧密连锁的基因 二：问答 1三位一体学说内容 突变单位、交换单位、功能单位 染色体上 2乳糖操纵子由哪些突变型，各如何表示 调节基因突变隐性突变i+ i~超阻遏突变 操纵基因突变组成型突变O+ Oc缺失突变O+ O~ 启动子突变p+ p~多为缺失突变 结构基因突变，多为隐性突变 3乳糖操纵子中，阻遏物与操纵基因有何相互作用 . 操纵基因中与阻遏蛋白的结合位点 . 阻遏蛋白中与操纵基因的结合位点 . 诱导物与阻遏蛋白的关系 . 阻遏蛋白抢先占据操纵基因区 . RNA聚合酶提前结合在启动子区域，抢先到达操纵区 4乳糖操纵子