第一步:获取目的基因方法: 1.从基因文库中获取目的基因。 2.利用PCR技术合成DNA 3. mRNA差异显示法获得目的基因 (反转录) 4.采用DNA合成仪人工合成长度不是很大的DNA片段。 5.用机械的方法,如超声波把打成片段。 原核生物基因表达的调 控 乳糖代谢基因表达调控图解:(有乳糖时) R P O lacZ lacY lacA 调节基 因 启动 子 操纵基 因 结构基 因 RNA聚合酶 信使 RNA 转 录 翻 译 阻抑物与乳糖结合后构象发生了改变,因而不能与 操纵基因结合,使得结构基因进行转录。 阻抑 物 乳糖 转 录 半乳糖苷酶 酶 酶 第二步: 基因表达载体的构建 核心 目的基因与载体结合成为重组基因 需要 哪两种 工具 总结:表达载体需由哪几部分组成 复制原点 启动子 目的基因 终止子 标记基因 它们的作用是? 第三步:将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入植物细胞 将目的基因导入动物细胞 将目的基因导入微生物细胞 什么叫转化 常用的转化方法有哪些? 具体过程? 第四步:目的基因的检测与鉴定 首先: 其次: 最后: 还要: 检测与鉴定哪些环节 具体 方法? DNA分子杂交技术 基因探针:核酸分子探针是指特定的已知核酸片段,能与互补核酸序列退火杂交,用于
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