(一)筛选菌株 提出的问题 —如何寻找耐高温的酶? 解决问题的思路 —寻找高温环境; 原理 —高温淘汰其他菌,选出耐高温细菌, 从耐高温菌种中提取耐高温酶。 实验的具体操作 ㈠.土壤取样 从肥沃、接近中性的潮湿土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。 ◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基 制备牛肉膏蛋白胨培养基 相同的菌液,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 (对照作用) 思考?为什么还要制备牛肉膏蛋白胨培养基? ㈡.制备培养基: 每个稀释度下需要3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基。 ◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行 ◆分离不同的微生物采用不同的稀释度 原因:不同微生物在土壤中含量不同 目的:保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板 (三)样品的稀释 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分
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