* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * Copyright? Jiangyong 限制性核酸内切酶(限制酶) 来源:主要从原核生物中分离 化学本质:蛋白质 作用:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 特性:特异性。即限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列,切割特定位点 切割后的DNA末端:黏性末端;平末端 分子缝合针----DNA连接酶 种类 T4 DNA连接酶:既能“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,也能“缝合”双链DNA的平末端(效率低) E·coli DNA连接酶:只能将双链片段互补的黏性末端连接 常用载体 质粒 λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 基因进入受体细胞的载体(分子运输车) * Copyright? Jiangyong * Copyright? Jiangyong (1)载体是基因运输工具,在基因操作过程中,使用载体有两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因送到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)种类:质粒(既存在于原核生物细菌中,也存在于真核生物酵母菌中)、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (3)本质:DNA(其中质粒为环状DNA分子) (4)作为载体必须具备三个条件: ①能在宿主细胞内稳定保存
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