鸡胚胎肌肉细胞中MC1R基因敲除研究介绍.docVIP

安徽大学 本科毕业论文（设计） 题　　目：　鸡胚胎肌肉细胞中MC1R基因敲除研究 学生姓名：　　廖 鹏　 学号： 院（系）： 生命科学学院　 专业：　 生物科学 入学时间：　 2010 　　年　 　 09 　 月 导师姓名：刘大海　 职称/学位：　 教授 　 导师所在单位：　 安徽大学生命科学学院 　 　 毕业论文（设计）提交时间： 二○一四 年　 六 月 鸡胚胎肌肉细胞中MC1R基因敲除研究 作者：廖鹏 安徽大学生命科学学院2010级生物科学专业，230601 指导教师：刘大海 安徽大学生命科学学院，230601 摘 要 目的： 建立鸡胚肌肉细胞MC1R基因基因敲除细胞系（+/-），为进一步在体内进行MC1R基因功能研究打下基础。方法： 设计CRISPR/Cas9 基因敲除载体sgRNA片段，构建基因敲除载体，转染鸡胚胎肌肉细胞，通过G418药物筛选和单细胞克隆技术获得细胞系，测定基因突变情况。结论：鸡胚胎肌肉细胞采用脂质体转染效率不高，下一步可以考虑采用慢病毒包装质粒转染； G418最适宜筛选浓度为500μg/ml；实验获得杂合突变细胞系12个，下一步可将该技术用于动物实验。 关键词：鸡胚；肌肉细胞；MC1R基因；CRISPR/Cas9