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关于唾液淀粉酶的最适PH 姓名 邱远 学号201150716 摘要：为了探究唾液淀粉酶的最适宜PH值，通过配置不同PH值的基质液作为酶与底物反应的环境，再加碘液与未反应的底物作用成色，用分光仪测定溶液吸光度来比较底物的剩余量，以此推断出唾液淀粉酶的最适宜PH的范围。 关键词：唾液淀粉酶 最适PH值 前言：作为一名医学生，未来的医生，通过实验来学习获得科研的基础知识，熟悉一些基本原则和操作，更是为了完成老师布置的作业。此次实验具有重要意义。 实验原理：淀粉经样品中淀粉酶的水解，生成糊精和麦芽糖。在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物。其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力成正比。即颜色越浅，吸光度越低，淀粉酶的活力越高。 操作步骤： 一：基质液的配置： 1：取十一支规格相同的干净试管，分别编号1到10.置于试管架的第一排。 2：按下表加入试剂。 配得的PH值 0.2mol/L的Na2HPO4（单位：ml） 0.2mol/L的Na2H2PO4 (单位：ml) 6.0 0.6 4.4 6.2 0.9 4.1 6.4 1.3 3.7 6.6 1.8 3.2 9.8 2.4 2.6 7.0 3.0 2.0 7.2 3.6 1.4 7.4 4.0 1.0 7.6 4.4 0.6 7.8 4.6 0.4 二：酶液的配置： 1：实验者用蒸馏水漱口，洗去残留食物，然后含一口蒸馏水在口中三分钟，时间到后将唾液吐在一个干净的纸杯。 2：取两个干净烧杯，分别标注为1:5和1:10. 1:5号烧杯 1:10号烧杯 蒸馏水（ml） 20 45 唾液 （ml） 5 5 三：反应进行。 1：去20支规格相同的试管，平均分成两组,分别编号1到20 其中1到10号试管加入1:5号烧杯的酶液置于试管架第三排 11到20号试管加入1:10号烧杯的酶液置于试管架第二排。 2.按下表在各试管中加入试剂。 试管编号 不同PH值的基质液， 都加0.5ml 0.5%的淀粉溶液（ml） 37 摄氏度。水浴保温8分钟 酶液（1到10号用1:5的酶液.； 11到20号试管用1:10）（ml） 37 摄氏度。水浴保温10分钟 碘液 ml 测得的吸光度 A660 1 6.0 05 0.5 0.5 0.055 2 6.2 0.5 0.5 0.5 0.032 3 6.4 0.5 0.5 0.5 0.041 4 6.6 0.5 0.5 0.5 0.024 5 6.8 0.5 0.5 0.5 0.043 6 7.0 0.5 0.5 0.5 0.032 7 7.2 0.5 0.5 0.5 0.100 8 7.4 0.5 0.5 0.5 0.051 9 7.6 0.5 0.5 0.5 0.141 10 7.8 0.5 0.5 0.5 0.864 11 6.0 0.5 0.5 0.5 0.051 12 6.2 0.5 0.5 0.5 0.105 13 6.4 0.5 0.5 0.5 0.114 14 6.6 0.5 0.5 0.5 0.096 15 6.8 0.5 0.5 0.5 0.141 16 7.0 0.5 0.5 0.5 0.433 17 7.2 0.5 0.5 0.5 1.050 18 7.4 0.5 0.5 0.5 0.829 19 7.6 0.5 0.5 0.5 1.376 20 7.8 0.5 0.5 0.5 1.522 3:因为用肉眼感觉各试管区别不是很明显，故在每一只试管中注入2ml的蒸馏水。 4：混匀后用分光度法在660nm波长下用蒸馏水调零，测量各管的A660。测得的读数已并入上表。 绘制成图： 四讨论： 1：总体来看，唾液淀粉酶在偏酸性的环境中活性较高。 2:从1到10号试管的吸光度都接近或低于相对应的同样PH值下的11到20号试管的吸光度。说明其他条件相同时，酶的浓度越高，对底物的消耗越多。 3：从1:5组的数据来看，4号试管的吸光度值最小，4号试管对应的PH值是6.6，推出唾液淀粉酶的最适ph值在6.5——6.7之间。 从1:10组的数据来看，12到15号试管的ph值都比较接近，11号试管（对应ph6.0）的吸光度最小，这与1:5组得出的推论不相符合。但14号试管（对应ph6.6与4号管一致）的吸光度也略小于13和15号，如果不考虑11号这个极端值，得出的结论应与1:5组的一致。 4：第18管的数值低于17号试管，不符合从14到20号试管的上升趋势，疑为问题数据。 5：查阅文献可知，唾液淀粉酶ph