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　检测系统的方法学性能验证 滨州市沾化区人民医院 丁良臣 目的与要求 要求： 掌握：定性试验和定量试验方法学评价的主要指标，定量试验的性能验证方法。 熟悉：定性试验评价的内容和方法 了解：检测系统评价的基本步骤 1.测量误差：测量结果减去被测量的真值的差，简称误差。 2.随机误差：测量结果与在重复条件下，对同一被测量进行无限多次测量所得结果的平均值之差。 3.系统误差：在重复性条件下，对同一被测量进行无限多次测量所得结果的平均值与被测量的真值之差称为系统误差。亦称为正确度． 4、正确度：检测结果离真值的偏移程度 5、精密度：表示测量结果中随机误差大小的程度。 6、准确度： 准确度是测量结果中系统误差（正确度）与随机误差（精密度）的综合。 二.更改检测系统的确认试验 准确度（EP9） 精密度（EP5） 可报告范围（EP6-P2） 参考区间（C28-A2） 分析灵敏度（ EP17-A） 线性范围（EP6-A） 分析特异性(包括干扰物质）（ EP7-P） 定量试验方法的验证和确认试验 未更改检测系统的验证 1、精密度（批内、批间） 2、准确度（标准物质、标准方法、方法学比对） 3、可报告范围（验证最大稀释倍数） 4、参考区间（检测20个正常样本验证） 二、评价的基本步骤 1. 确定方法的质量目标，总允许误差 2. 选定评价指标 　　　有量值溯源的配套检测系统，正确度、精密度、可报告范围、参考区间验证。 　　　不配套的检测系统：线性范围、回收和干扰试验 3. 收集评价的实验数据 4. 判断方法的临床可接收性 三、评价文件（1） EP5-A：临床化学设备操作精密度评价 核准指南 EP6-A：定量分析方法的线性评价： EP7-P：临床化学实验干扰 ，用于干扰物对检测结果影响的定性。 EP9-A：用病人标本进行方法学比较和偏倚评估 ，主要用于检测两种临床方法或设备间的偏倚。 评价文件（2） EP10-A：定量实验室方法的初步评价 EP14-A：基质效应的评价 EP15-A：精密度和准确度性能的应用 EP21-P（NEW）：临床实验方法总分析误差的评估 1.批内方案 2.批间方案 3.EP方案（EP5-Ａ，EP15－A） 1.用有量值溯源的参考物质进行测定 2.使用决定性方法或参考方法 3.与具有量值溯源检测系统进行比对（1）EP方案（EP9-Ａ，EP15－A） （2）简易比对方案 测定方法 注意： 1，可一天，但不超过4小时内。 2.可3-4天（但尽可能短）。 3.每个标本只需测定1。 4.二种方法都有室内质控 计算偏移 　　1.偏移 2.相对偏移 3.平均偏移 4.相对平均偏移 5.与质量要求比较 1.选择高、中、低浓度五份样本同时用各台仪器按常规样本测定的方法，测定其各项参数，每份样本测定2次，求其均值。 3.计算与核对标准 [1] 计算：按PT计算方法计算偏倚。 PT计算公式：（确定仪器测定值-比对仪器测定值）/确定仪器测定值×100 [2] 标准： 偏移偏倚保持所有标本结果差异在CLIA88允许误差的1/4内 检验科比对记录 1.确定测量的线性范围和临床上可能出现的范围。 2.取线性范围内的高值标本，用稀释液稀释，最低预期值在线性低限。 3.计算回收率：在可接受范。 最大稀释倍数测定 4.可报告范围计算： （1）上限为线性范围上线×稀释倍数 （2）下限为线性范围低限 一、验证的内容（掌握）: （1）敏感性 （2）特异性 （3）正确度 （4）符合性 （5）精密度(Precision) （6）CUTOFF值验证 二、定性临床应用与分类 1、定性测定的临床应用 ?免疫学测定：感染性疾病、肿瘤标志物 ?核酸和基因检测 ?微生物检验 ?细胞学检验 ?寄生虫检验验 2、定性实验的临床分类 筛查实验：如便潜血、TP 诊断实验：如微生物学培养与细菌鉴定 确认实验：对以上已做出的检验结果进行验证和确认 几个重要概念及计算公式的回顾: 1.敏感性:将实际患病者正确诊断为阳性的百分率。 计算公式为：真阳性/（真阳性+假阴性）X 100% . 2.特异性 :指将实际无病者检测为阴性的百分率。 计算公式为：真阴性/( 真阴性+假阳性） X 100% . 阳性结果的可靠性（预示值）：即测定为阳性的标本实际上为阳性的可能性。 =[真阳性/（真阳性+假阳性）]×100% 阴性结果的可靠性（预示值）： 则为一份给出阴性结果的样本实际上为阴性的可靠性。 = [真阴性/（真阴性+假阴性）]×100% （一）准确度验证: 1 .样本的临床诊断已知（