分菌方法2技术分析.docVIP

一般液体或固体样品的细菌筛选方案： 以无菌操作吸取样品lmL/1g于9mL无菌生理盐水中,呈1:10的稀释液，摇荡搅拌溶解，得到为10-1，依次类推，依次得到10-2,10-3,10-4,10-5 ； 加适量稀释样品到45-55oC的MRS琼脂培养基/LB加富营养琼脂MRS培养基（乳酸菌筛选培养基）： 配制（1L）:蛋白胨 10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母提取物 5.0g，K2HPO4 2.0g，柠檬酸三铵 2.0g，乙酸钠 5.0g，葡萄糖 20.0g，吐温80 1.0mL，MgSO4·7H2O 0.5g，MnSO4·4H2O 0.25g；调PH至6.2～6.4； 酪蛋白胨 10g/L，牛肉浸膏 8g/L,酵母浸膏 4g/L，磷酸氢二钾 2g/L，柠檬酸二铵2g/L，葡萄糖20g/L，吐温80 1g/L，葡萄糖 20g/L，醋酸钠 5g/L，硫酸镁 0.2g/L，硫酸锰 0.04g/L，琼脂 14g/L。 CaCO3溶圈法： 2.称取20g CaCO3加入到100mL蒸馏水中，制成CaCO3乳浊液； 3.将MRS培养基和CaCO3乳浊液分开灭菌； 4.倒平板前，待培养基融化冷却后，平板上加入一定量的CaCO3乳浊液，晾干了以后再接种。 溴甲酚绿指示剂法： 1、培养基：MRS培养基（含溴甲酚绿酒精溶液） 2、同上，不同之处是稀释涂布后长出菌落，挑取使溴甲酚绿变色的菌落。 DN