流式细胞术(FCM)的工作原理及其在免疫学上的应用创新.doc

流式细胞术（FCM）的工作原理及其在免疫学上的应用 摘 要：流式细胞术(flow cytometry，FCM)[1]。 近年来，随着流式细胞免疫学技术的迅速发展，流式细胞术与单克隆抗体技术结合，使细胞表面和细胞内抗原，癌基因蛋白及膜受体的定量检测取得了很大进展。流式免疫技术克服了普通免疫学方法难以准确定量的不足，形成了流式免疫学独特的科学分支，成为研究细胞免疫学的先进技术之一。随着科学技术的发展，多种新的荧光探针的不断出现，使 FCM技术的应用范围不断扩大，特别是各种各样的荧光探针标记的单克隆抗体和其他蛋白质的出现，为 FCM 研究各种组织细胞膜和细胞内抗原、肿瘤性蛋白等开辟了新途径 [2]。 1 .流式细胞术与流式细胞仪 1.1流式细胞技术： 　流式细胞技术是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微球，测量其产生的散射光和发射荧光的强度；经染色的细胞或微球在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞或微球经过焦点时，发出一束散射光/或荧光；它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器光电倍增管或一个固态装置），光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后 而成整数，然后进行电子存储，以后数据可以调出显示和进行分析；并可能将感兴趣的细胞进行分选[3]。 流式细胞技术是一种能够对细胞或微球的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定