观察DNA和RNA在细胞中的分布重点分析.doc

（二）观察DNA和RNA在细胞中的分布 “观察DNA、RNA 在细胞中的分布”是人教版生物必修一第二章第三节的实验。教科书建议使用人口腔上皮细胞做材料，进行固定、酸解、漂洗、染色等一系列操作，观察DNA、RNA 在细胞中的分布。但在教学实践中发现，按照教科书所示的实验方法难以做出预期的实验结果。常见口腔上皮细胞整个被染成粉红色，既没有出现甲基绿的颜色，也不能清晰分辨RNA的颗粒结构。 该实验原理是利用甲基绿和吡罗红对DNA 和RNA 亲和力的不同，让甲基绿与DNA 结合，使DNA 呈现绿色；让吡罗红与RNA 结合，使RNA 呈现红色。现今对这一染色机理有两种解释：电离作用与聚合作用。 （1） 电离作用：DNA 和RNA 都有磷酸基和碱基，为两性电解质，在一定的条件下可电离，因此都有等电点。甲基绿和吡罗红在水中电离后都产生阳离子。甲基绿电离后带两个正电荷，碱性较强。吡罗红电离后仅带一个正电荷，碱性较甲基绿弱。染色时两者竞争，碱性较强的甲基绿与细胞核形成极性吸着而结合，等电点为pH3.8~4.8。碱性较弱的吡罗红与细胞质吸附结合，等电点pH4.6~5.2。 （2） 聚合作用：甲基绿对聚合高的DNA 有亲和力，吡罗红对聚合低的RNA有亲和力。由染色机理可见，甲基绿与吡罗红的细胞染色对pH 要求很高。教材提供的试剂配方也提到B 液需将pH 调整到4.8，正是保证了甲基绿