生理指标的测定1创新.docVIP

一 叶绿素的测定-丙酮乙醇提取比色法 参照张宪政（1986）的方法: 1、先配制乙醇：丙酮=1：1的混合溶液（80%:80%）装入棕色瓶中保存。 2、取叶片0.5-1g剪碎，放入50 ml的培养瓶中，再加入20 ml的配制好的上述混合液，盖上瓶盖，置于10℃冷库避光存放36 h(直到叶片泛白)，其间摇晃2-3次，使叶绿素充分溶解在混合液中。 3、避光保存36 h后，过滤混合溶液，以提取液作为对照，在紫外分光光度计下分别测定652 nm、663 nm和645 nm处的吸光值。 4、计算公式 叶绿素a的含量=（12.7*OD663-2.69*OD645）/50+（22.9*OD663-4.68*OD645）/50 叶绿素b的含量=（22.9*OD663-4.68*OD645）/50 总叶绿素的含量=（20.2* OD645+8.02* OD663）*V/1000*W 或 总叶绿素的含量=(A652 /34.5)*V/1000*W (叶绿素a和叶绿素b在652nm下有相同的吸光系数，为34.5) 其中V为提取液体积，W为叶片重量，叶绿素含量单位为mg/g(FW). 二、维生素C含量的测定 李合生，2000年，比色法：常规测定抗坏血酸的方法是采用2，6—二氯酚靛酚滴定法，但因某些叶片中花青素量较高，当用酸提取时呈红色，因而无法滴定。本实验采用二甲苯萃取比色法，测不