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3种肝炎药物对小鼠免疫功能影响.doc
3种肝炎药物对小鼠免疫功能的影响
更新日期:2010-03-30 点击: 韩少兰 陈家春 蔡大勇 赵刚
提要 用阿昔洛韦(无环鸟苷)、乙肝解毒胶囊和乙肝扶正胶囊对小鼠免疫功能的影响进行了观察。结果表明以上3种药物分别能降低小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数,对小鼠脾淋巴细胞转化有明显促进作用,但对小鼠血清溶菌酶浓度无影响,对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率无影响。
关键词 3种肝炎药物; 阿昔洛韦; 乙肝解毒胶囊; 乙肝扶正胶囊; 小鼠免疫功能; 影响
阿昔洛韦(无环鸟苷)是常用的抗病毒性合成药物。临床上主要用于抗疱疹病毒和乙肝病毒的治疗。乙肝解毒胶囊和乙肝扶正胶囊为近年研制出的治疗乙型肝炎的中药制剂。前者清热解毒,疏肝利胆,用于乙型肝炎辨证属于肝胆湿热内蕴者;后者补肝肾,益气活血,用于乙型肝炎辨证属于肝肾两虚证候者。由于乙肝致病与人体免疫功能密切相关,但以上药物对免疫功能的影响还未见报道。因此,本文系统研究了以上3种药物对小鼠免疫功能的影响,并在组间进行了比较。现将研究结果报道如下。
1 实验材料和给药方法
1.1 动物:昆明种小鼠,雌雄兼用,鼠龄6~8周,体重20±2 g。由湖北医科大学动物房提供。
1.2 药物:阿昔洛韦,(90)卫药准字X-97号注射用阿昔洛韦,批号为930309,湖北省医药工业研究所科益药厂生产,规格250 mg/支,每支溶于22.8 ml N.S中,备用。乙肝解毒胶囊,WSa-B-0001-89川卫药准字(89)-5061号,批号为921128,四川万县地区中药厂生产,规格0.25 g/粒,每1粒溶于7.5 ml N.S中,备用。乙肝扶正胶囊,WSa-B-0001-89川卫药准字(89)-5060号,批号为920926,四川万县地区中药厂生产,规格0.25 mg/粒,每1粒溶于7.5 ml N.S.中,备用。
1.3 分组及用药:将小鼠随机分成4组,每组8只。雌雄兼用,自由饮食。正常对照组:N.SO.15 ml/10 g q.d×14 d;阿昔洛韦组:0.15 ml/10 g(即164.5 mg/kg)q.d×14 d;乙肝解毒胶囊组:0.15 ml/10 g(即500.00 mg/kg)q.d×14 d;乙肝扶正胶囊组:0.15 ml/10 g(即500.00 mg/kg)q.d×14 d。
2 方法与结果
2.1 对小鼠血清溶菌酶的影响(血清溶酶浊度法)
2.1.1 新鲜菌液的制备:将Micrococus Lysodeikticus接种在普通琼脂上,37 ℃下培养30 h,用1/15MPBS(pH6.4)洗下,配制成混悬菌液。用721型分光光度计在波长640 nm处测定并调节其浓度到透光度为36%,即得。
2.1.2 溶菌酶标准溶液的制备:精密称取溶菌酶标准品9.2 mg,用1/15 mol/LPBS(pH 6.4)9.2 ml配成1.000 mg/ml原液,放冰箱保存,临时稀释成200、100、50、25 μg/ml。
2.1.3 测定:第15 d放血处死小鼠,测血清溶菌酶含量。
2.1.3.1 血清经4倍稀释后取0.2 ml放于小试管内,37 ℃水浴箱内预热5 min,再向管内加入预热的菌液1.8 ml,混匀,立即记时,至2 min时加入5 N KOH停止反应,迅速将菌液倒入比色杯内,在640 nm波长下测其透光率(T 1%)。
2.1.3.2 血清经4倍稀释后取0.2 ml放于小试管内,先加5 N氢氧化钾1滴,混匀,在37 ℃预热5 min,再加入预热的菌液1.8 ml摇匀,37 ℃水浴箱内2 min后同条件下测透光率T 0%。
2.1.3.3 △T %=T 1%-T 0%为透光度差值,即溶菌酶所致透光率的变化,从标准曲线上可查得血清中溶菌酶含量。
2.1.4 标准曲线的制备:以0.2 ml各浓度溶菌酶标准液代替被检查血清,操作步骤与血清同。以透光率差值的对数为纵坐标,溶菌酶浓度的对数值为横坐标,在坐标纸上绘制标准曲线。
2.1.5 统计处理:各动物血清检测的透光率差值的对数值,查对标准曲线得到溶菌酶浓度的对数值,计算溶菌酶的浓度。按组间t检验,统计比较血清溶菌酶的组间差异。结果见表1、表2。
表1 溶菌酶标准液的透光率(用于标准曲线)
管号 T1% T2% △T% log△T% logX X(μg/ml)
01 61.1 19.7 41.9 1.622 2.301 200
02 45.2 23.3 21.9 1.340 2.000 100
03 32.4 21.2 11.9 1.049 1.699 50
04 28.9 22.7 6.2 0.792 1.389 25
表2 对小鼠血清溶菌酶的影响(±s)
组 别 dose n ±s P值
正常对
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