RNA干扰Survivin和neu基因对卵巢癌细胞株SKOV3%2fDDP细胞生长、凋亡和药物敏感性的作用.pdfVIP

中国协和医科人学中国医学科学院硕士学位论文 中文摘要 背景与目的RNA于扰(RNA 的、在mRNA水平特异关闭相应基斟的基因阻断新技术，在基因功能的研究方 碰已经展现显著功效，对于基因治疗亦具有极大的应用前景。Survivin及Hell 基冈与卵巢癌细胞的生长、凋亡及耐药性相关。本研究旨在探讨Survivin及 HER-2／neuRNAi对卵巢癌耐药细胞株SKOV3／DDP细胞生长、凋亡及药物敏感 性的作用，寻找下调基因表达并逆转化疗耐药的方法，为卵巢癌的基因治疗探 索新途径。 l，o—u6表达载体构建Survivin及 方法应用台有u6启动子的pSilencer 镜下观察转染前后细胞的变化；用RT-PCR及WesternBlot检测Survivin及1leU 基因mRNA及蛋白的表达；MTT法检测细胞生长情况；流式细胞仪检测细胞 凋亡及周期的变化；加入顺铂后检测RNAi对SKOV3／DDP顺铂药物敏感性的 影响。 结果Survivin及HER一2／neu RNAi可明显下调卵巢癌耐药细胞株 速度减慢，生长曲线低平；细胞凋