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生物技术复习资料 基因工程 一．专业符号 Tetr 四环素抗性 R/M体系 Ampr 氨苄青霉素抗性 pBR322 质粒载体 M13 单链噬菌体载体 cosmid 科斯质粒 IPTG 异丙基-β-D硫代半乳糖苷 DNA ligase DNA连接酶 EcoRI 一种限制酶 host 宿主 Plasmid 质粒 Ori 复制起始位点 vector 载体 cDNA 互补DNA southern blot DNA印迹转移技术 MCS 多克隆位点 二．名词解释 生物工程bioengineering——利用生物有机体（包括微生物和动、植物）或其组成部分（包括器官、组织、细胞、细胞器）和组织成分（包括DNA、RNA、蛋白质、酶、多糖、抗体等），形成新的技术手段来发展新产品和新工艺的一种技术体系。也是采用先进生物学和工程学技术，有目的、有计划定向加工制造生物产品的一个新兴技术领域。 免疫分析法——免疫分析法是利用抗原抗体特异性结合反应检测各种物质（药物、激素、蛋白质、微生物等）的分析方法。 基因工程——指按照人们的意愿，在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之转入到原先没有这类分子的宿主细胞内，形成能持续稳定繁殖的新物种。其目的是为人类提供有用产品及服务。 感受态细胞——能从其周围摄入DNA的细胞称为感受态细胞。 同聚物加尾法——利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)转移核苷酸的特殊功能，将同种核苷酸（dNTP)加到DNA分子单链延伸末端的3‘-OH上。如果在目的基因两侧加polydA，则在载体两侧加polydT。长度一般10~40个残基。可以连接任何两段DNA分子的普遍性方法。 原位杂交技术——根据核酸杂交原理，利用基因探针检出培养板上重组 转化体菌落位置的技术称之为原位杂交技术。 DNA接头——它是一类人工合成的一头具有某种限制酶粘性末端，另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。 标记营救——SV40 DNA为载体的取代克隆方式又分为早期基因区域取代及晚期基因区域取代两种类型。晚期基因区域取代方式是以外源性DNA片段取代晚期基因区域，构成的重组DNA在宿主中可以复制，但不能产生重组病毒颗粒，因而采用早期基因缺失的SV40病毒突变种作为辅助病毒与晚期取代重组DNA或和感染宿主，则晚期区域取代重组DNA可获得标记营救，辅助病毒产生的晚期基因产物与重组病毒的早期基因产物一起可形成完整病毒颗粒。 早期区域取代方式是以外源性DNA片段取代早期基因区域，但重组DNA形成病毒颗粒与早期区域基因产物T抗原供应有关，故同样可采用晚期基因区域缺失的SV40突变种作为辅助病毒进行标记营救，即可形成完整病毒颗粒。 R/M体系——大多数的细菌对于噬菌体的感染都存在一些功能性障碍，即所谓的寄主控制的限制(restriction)和修饰(modification)现象，简称R/M体系。 衔接物——指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成，具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸段片断。 同尾酶——虽来源各异，识别的靶子序列也各不相同，但都产生出相同的粘性末端的限制性内切酶，称为同尾酶。 基因文库——是将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA片段随机地同相应的载体重组、克隆，所产生的克隆群体代表了基因组DNA的所有序列。 启动子——启动子是位于结构基因5端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。 转化Transformation——自然的转化是指将携带某种遗传信息的DNA分子引入宿主细胞，通过同源重组作用获得具有新遗传性状的生物细胞的过程，基因工程操作中的转化是泛指将重组DNA转入宿主中的方法。 多克隆位点——DNA载体序列上人工合成的一段序列，含有多个限制内切酶的单一识别位点。能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。 回文结构——双链DNA中含有的二个结构相同、方向相反的序列称为反向重复序列，也称回文结构。 同裂酶——识别顺序与切割方式均相同的限制性内切酶。 安慰诱导物——能高效诱导酶的合成，但又不被所诱导的酶分解的分子，如，IPTG是一种乳糖类似物，再无乳糖的条件下，他可以诱导细胞合成半乳糖苷酶。因此，IPTG被称为β半乳糖苷酶的安