免疫缺陷病与性传播疾病的实验诊断讲义.doc

免疫缺陷病与性传播疾病的实验诊断 小结 HIV 、TP 概念、定义 （了解） HIV 、TP病毒学、流行病学 （理解） HIV 、TP的临床检验 （掌握） HIV 、TP实验结果的解释与应用 （掌握） 免疫缺陷病（immunodeficiency diseases，IDD） 定义与分类 是指由于免疫系统发育不全或遭受损害所致的免疫功能缺陷引起的疾病。临床表现为反复感染或严重感染。 原发性（先天性）免疫缺陷病(premary immunodeficiency disease ，PID) 继发性（获得性）免疫缺陷病(secondary immunodeficiency disease ，SID) 常见的原发性免疫缺陷性疾病 原发性抗体缺陷病 X-连锁无丙种球蛋白血症 选择性IgA缺乏症 原发性T细胞缺陷病 先天性胸腺发育障碍 T细胞特异性免疫缺陷症 慢性皮肤黏膜念珠菌病 原发性吞噬细胞功能缺陷病 慢性肉芽肿病 白细胞黏附缺陷 原发性联合免疫缺陷病 原发性补体缺陷病 免疫缺陷性疾病常用检测方法 体液免疫检测 抗体测定：IgG、 IgA、 IgM、IgD、IgE 补体测定：CH50、C3、C4等 细胞免疫检测 细胞表型分析：T细胞分化抗原检测、B细胞膜表面免疫球蛋白检测、B细胞分化抗原检测 细胞功能测定：T细胞花环形成试验、T细胞转化试验、混合淋巴细胞试验、自然杀伤细胞活性检测等 细胞因子测定：IL-2、IL-6、IL-8、 IL-10、TNF等 相关基因检测 性传播疾病 定义 性传播疾病简称性病，指主要通过性接触、类似性行为及间接接触传播的一组传染病。 包括艾滋病、梅毒、淋病、软下疳、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、尖锐湿疣、生殖器念珠菌病、细菌性阴道病、滴虫病和乙型肝炎等20余种疾病。 艾滋病（获得性免疫缺陷综合征，Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS） 病原学 HIV在外界环境中的生存能力: 干燥环境中，HIV活性在几小时降低90－99％ 在室温（18－30℃）液体环境下，HIV可存活15天以上 对一般消毒剂如酒精、次氯酸钠、戊二醛等敏感 WHO推荐的灭活HIV方法：100℃ 20分钟 艾滋病的致病机制：HIV感染→CD4+T→免疫功能缺陷 艾滋病的传播 传染源：AIDS病人、无症状HIV感染者 两个必要条件：皮肤有缺口或粘膜暴露、有足够量的病毒进入体液 临床特点 早期：持续性的体重减轻、间歇热、慢性腹泻、全身淋巴结肿大 晚期： 机会性感染：多见卡氏肺囊虫和白色念珠菌感染 恶性肿瘤：Kaposi肉瘤和恶性淋巴瘤 神经系统损害：AIDS痴呆症 艾滋病的临床检验 HIV抗体检测 初筛实验： ①酶联免疫吸附法 ELISA ②硒（金）标法 ③明胶颗粒凝集法 PA ④电化学发光法 ECLIA HIV初筛试验结果的解释： 阳性： 确认实验阳性，即为HIV感染者或AIDS。 婴儿HIV阳性，需18个月后检测阳性经确 认阳性者才能诊断（婴儿被动获得IgG，8-14个月消失，18个月后产生自已的抗体） 阴性： 确实阴性 窗口期 高危行为后3个月内为阴性，则可排除HIV感染 确证实验： ①蛋白印迹法 WB:（Western Blot）： 阳性: 二条env带或一条 env带加一条 P24带; 阴性：无任何条带 不确定：有一个或几个条带，但不满足阳性标准 ②条带免疫印迹法 SIA或LIA ③放射免疫沉淀试验 RIPA ④间接免疫荧光试验 IFA HIV病原学检测 病原学检测方法 核酸检测（cDNA测定-PCR、RNA测定-病毒载量） 应用于 早期诊断围产期HIV感染的辅助诊断： 宫内感染（检测定义）： 新生儿出生48小 时内检测到病毒核酸，或病毒培养阳性，则 提示孕期(宫内）感染。 对18个月婴儿HIV抗体WB试验的不确定（或可疑）结果进一步做辅助诊断； 在HIV抗体未产生之前（窗口期）辅助诊断急性原发感染； H I V亚型分析；确定人群中H I V的变异； 监测临床抗病毒药物治疗效果； 检测病毒的耐药性突变。 病毒培养分离 P24抗原检测：①酶联免疫吸附法 ELISA ②放射免疫试验 RIA ③间接免疫荧光试验 IFA 适用于： HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断 HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅 助诊断。 第四代HIV抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应，但HIV-1抗体确认试验呈阴性者的辅助诊断。 监测病程进展和抗病毒治疗效果。 CD4+T淋巴细胞检测 ① CD4+T淋巴细胞数目 ② CD8+T淋巴细胞数目 ③ CD4+T/CD8+T的比例 梅 毒 梅毒：一种性传播疾病