3细胞生物学研究方法要点详解.ppt

* 2.3.2　免疫电镜技术： ?免疫铁蛋白技术：铁蛋白提取繁琐，分子量大，不易进 入细胞。 ?免疫酶标技术：反应没有特异性，不能进行感受部位的 点对点对应。 ?免疫胶体金技术：胶体金是直径1-100mμm的金颗粒分 散在水中形成的金溶胶。特异性强，容易识别。分辨 率高。 应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分 泌动态；胞内酶的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的 定位等 免疫胶体金技术 2.4　细胞内特异核酸的定位与定性 原位杂交技术 放射性同位素标记探针 荧光素标记探针 生物素标记探针 斑马鱼基因的原位杂交 2.5　定量细胞化学分析技术 2.5.1　细胞显微分光光度术（microspectrophotometry） 利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质（如核酸与蛋白质等）在细胞内的含量。 2.5.2　流式细胞仪（Flow Cytometry） 用于定量测定细胞中DNA、RNA或某一特异蛋白的含量； 测定细胞群体中不同时相细胞的数量； 从细胞群体中分离某些特异染色的细胞； 分离DNA含量不同的中期染色体。 流式分选仪 ＋2000V －2000V 高压偏转板 充以正电的小水滴 充以正电的小水滴 分别收集细胞 激光 排列成单列的细胞通过激光束时，仪器可测定出标记细胞上的荧光强度； 仪器使带有荧光细胞的小水滴充电； 带电水滴通过高压偏转板偏离原来方向，收集细