气相色谱法-蚊液.pptVIP

气相色谱法 Gas Chromatography 色谱法建立 1906年Tsweet在研究植物液色素成分时，将植物液的浸取液加到一根填充了碳酸钙的竖立玻璃管中，浸取液中的色素被吸附到碳酸钙上，然后用石油醚冲洗，结果发现在玻璃管内的色素被分离成几个具有不同颜色的色带，他将这种分离方法称为“色谱法”，色谱由此得名。在此后的20多年里，几乎无人问津这一技术。到了1931年，Kuhn等用同样的方法成功地分离了胡萝卜素和叶黄素，从此，色谱法开始为人们所重视，此后，相继出现了各种色谱方法。现在，“色谱法”已广泛用于无色物质的分离，“色谱”已失去了它原来“色”的含义，但其名称一直沿用至今。 色谱法分离原理 色谱法是一种分离方法，它利用被分离的诸物质在互不相溶的两相中分配系数的微小差异进行分离。当两相作相对移动时，使被测物质在两相之间进行反复多次分配，使原来微小的差异累加产生了很大的效果，形成差速迁移，使各组分在柱内移动的同时逐渐分离，以达到分离、分析及测定一些物理化学常数的目的。 色谱法的特点 1．分离效率高：可在很短的时间内分离多达二、三百个组分的复杂物质，柱效能可达106的理论板。 2．检测能力强：可以检测出10-11~10-15克级的痕量组分，能满足环境检测、农药残留等大量日常检测分析的需要。 3．样品用量少：样品用量一般为微升级，少的可达纳克级。 4．适用范围广：几乎所有与化学有关的领域都有其用武之地。 气相色谱多用高沸点的有机化合物涂渍在惰性载体上作为固定相，一般只要在450℃以下有1.5KPa-10KPa的蒸汽压且热稳定性好的有机及无机化合物都可用气液色谱分离。 由于在气液色谱中可供选择的固定液种类很多，容易得到好的选择性，所以气液色谱有广泛的实用价值。 气相色谱仪 GC工作过程 气相色谱仪的结构 气相色谱仪由五大系统组成：气路系统、进样系统、分离系统、控温系统以及检测和记录系统。 1. 气路系统 气相色谱仪具有一个让载气连续运行、管路密闭的气路系统。通过该系统，可以获得纯净的、流速稳定的载气。它的气密性、载气流速的稳定性以及测量流量的准确性，对色谱结果均有很大的影响，因此必须注意控制。 常用的载气有氮气和氢气，也有用氦气、氩气和空气。 2. 进样系统 进样系统包括进样器和气化室两部分。 （1）进样器:将样品引入气相色谱系统内,液体样品的进样一般采用微量注射器。 （2）气化室:气化室的作用是将液体或固体试样，在进入色谱柱之前瞬间气化，然后快速定量地转入到色谱柱中。 为了让样品在气化室中瞬间气化而不分解，因此要求气化室热容量大，无催化效应。为了尽量减少柱前谱峰变宽，气化室的死体积应尽可能小。 3. 分离系统 分离系统由色谱柱组成,色谱柱是色谱分析的心脏 色谱柱主要有两类：填充柱和毛细管柱。 （1）填充柱由不锈钢或玻璃材料制成，内装固定相，一般内径为2 ~ 4mm，长1 ~ 3 m。填充柱的形状有U型和螺旋型二种。 （2）毛细管柱又叫空心柱，分为涂壁、多孔层和涂载体空心柱。空心毛细管柱材质为玻璃或石英。内径一般为0.2 ~ 0.5mm，长度30 ~ 300m，呈螺旋型。 U型填充柱 毛细管色谱柱 气液色谱固定液 1. 对固定液的要求 固定液一般为高沸点的有机物，能做固定相的有机物必须具备下列条件： 第一，热稳定性好，在操作温度下，不发生聚合、 分解或交联等现象，且有较低的蒸汽压，以免固定液流失。通常，固定液有一个“最高使用温度”。 第二，化学稳定性好，固定液与样品或载气不能发生不可逆的化学反应。 第三，固定液的粘度和凝固点低，以便在载体表面能均匀分布。 第四，各组分必须在固定液中有一定的溶解度，否则样品会迅速通过柱子，难于使组分分离。 2. 固定液和组分分子间的作用力 固定液为什么能牢固地附着在载体表面上，而不为流动相所带走？为什么样品中各组分通过色谱柱的时间不同？这些问题都涉及到分子间的作用力。前者，取决于载体分子与固体分子间作用力的大小；后者，则与组分、固定液分子相互作用力的不同有关。 分子间的作用力是一种极弱的吸引力，主要包括静电力、诱导力、色散力和氢键力等。 如在极性固定液柱上分离极性样品时，分子间的作用力主要是静电力。被分离组分的极性越大，与固定液间的相互作用力就越强，因而该组分在柱内滞留时间就越长。 又如存在于极性分子与非极性分子之间的诱导力。由于在极性分子永久偶极矩电场的作用下，非极性分子也会极化产生诱导偶极矩。它们之间的作用力叫诱导力。极性分子的极性越大，非极性分子越容易被极化，则诱导力就越大。当样品具有非极性分子和可极化的组分时，可用极性固定液的诱导效应分离。例如，苯（B.P.80.1℃