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2.胚胎分割: 3.胚胎干细胞: 【高考警示】(1)滋养层≠饲养层。 ①滋养层:囊胚时期沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞,滋养层最终发育成胎膜和胎盘。 ②饲养层:饲养层细胞一般为输卵管上皮细胞,在干细胞培养时,可作为提供干细胞分裂、增殖的营养细胞。 (2)不同动物胚胎移植的时间不同。 ①牛、羊要培养到桑椹胚或囊胚阶段。 ②小鼠、家兔在桑椹胚前。 ③几乎所有动物都不能到原肠胚阶段移植,因为此时分化程度高,移植成功率很低。 【考题回访】 1.(2014·福建高考)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图: (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 。 (2)步骤②中,重组胚胎培养到 期时,可从其内细胞团 分离出ES细胞。 (3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2 基因的 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用 HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。 为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。 (4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞 的 ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。 【解题指南】(1)关键知识:检测目的基因表达的方法是抗原-抗体杂交(免疫)法。 (2)图示信息:过程①利用了动物细胞核移植技术;过程②利用了胚胎工程技术;过程③利用了基因工程的相关技术。 【解析】本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程技术。 (1)步骤①是核移植过程。体细胞核移植前要除去受体卵母细胞的细胞核,原因是若不去掉卵母细胞的细胞核,就会造成细胞里面有两个细胞核,使得遗传物质不稳定。 (2)ES细胞是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团分离出来的一类细胞。 (3)步骤③为获取目的基因,并把目的基因导入受体细胞的过程。在生物体外可通过PCR技术扩增目的基因,其条件是模板DNA、根据Rag2基因的核苷酸序列设计的引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶等,另外根据题干可知,获得Rag2基因需要用HindⅢ和PstⅠ限制酶,所以在构建表达载体时,所选择的表达载体上应具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位点。 (4)检测目的基因是否翻译相应蛋白质时,应采用抗原—抗体杂交(免疫)法,即提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原—抗体杂交,看是否有杂交带。 答案:(1)细胞核 (2)囊胚 (3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白质 2.(2014·山东高考)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下: (1)htPA基因与载体用 切割后,通过DNA连接酶 连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞 DNA,可采用 技术。 (2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使 其 。采集的精子需要经过 ,才具备受精能力。 (3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是 。为了获得 母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。利 用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期 胚胎细胞的 。 (4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到 ,说明目的基 因成功表达。 【解题指南】(1)图示信息:转htPA基因母羊羊乳的获得过程。 (2)关键知识:用同种限制酶切割目的基因与载体,获得相同的黏性末端,才能进行碱基互补配对。 * 专题3 胚胎工程 2014年(6考):新课标全国卷ⅠT40,福建T33,江苏T2、T19、T28,山东T36 2013年(3考):新课标全国卷ⅠT40,山东T35,江苏T13 2012年(3考):山东T35,江苏T9,浙江T2 三年 考题 1.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础 Ⅰ 2.胚胎干细胞的移植 Ⅰ 3.胚胎工程的应用 Ⅱ 三年12考 高考指数:★★★★★ 考纲 考情 1.考查内容:受精过程和早期胚胎发育的规律、体外受精操作步骤、早期胚胎培养、胚胎分割及胚胎移植等。 2.考查方式:常以图形为载体,结合人类的生产生活,结合必修免疫部分、细胞分裂等内容,通过胚胎工程、克隆技术等,考查对各种生物技术的过程及相关概念的理解,以及综合解决实际问题的能力。 3.考查题型:主要以非选择题的形式出现,属中档题。 考情 播报 【知识梳理】 一、体内受精和早期胚胎发育 1.体内受精: (1)场所:雌
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