选修3-2细胞工程分析.pptVIP

细胞工程的发展 1907年，美国哈里森采用盖破片悬滴培养蛙胚神经组织，观察到细胞的生长现象，并记录到存活数周的细胞，开创了动物细胞培养的先河。 1937年，法国高特里特等人几乎同时离体培养了胡萝卜组织，并使细胞增殖，这是首次成功进行的植物细胞与组织培养。 1972年，美国卡尔逊等人用硝酸钠作为促融合因子，成功的将2个不同种的烟草细胞原生质体进行融合获得了世界上第一个体细胞杂交植株。 1997年英国伊恩.威尔穆特等人利用成年芬兰白面母羊体细胞的细胞核与苏格兰黑面母羊的去核卵细胞首次克隆出绵羊“多利”。 2.分类： 根据研究对象的不同 植物细胞和组织培养技术 是在无菌条件下分离植物细胞或组织，将其放在适当的培养基上，给予比要的生长条件，使它们在体外继续生长、增殖与分化，形成新的组织、器官和个体的技术。 细胞融合技术 是采用自然或人工的方法使2个或多个不同细胞融合为一个细胞的技术。在促融合因子的作用下，细胞之间的质膜发生粘连、破裂，细胞质发生融合，进而发生核融合，形成杂种细胞。 常用的促融合方法： 生物法（如病毒诱导融合法） 化学法（如聚乙二醇诱导融合法） 物理法（如电场诱导融合法） 细胞核移植技术 是将一个细胞的细胞核转移到另一个去除细胞核的细胞中去，从而使受体细胞获得新的遗传信息，产生新的生命现象的技术。 染色体工程 是人们按照一定的设计，有计划地消减、添加或替换同种或异种染色体，从而达到定向改变遗传性状和选育新品种的一种技术。 3.应用 快速培养花卉及濒危植物 获得无病毒作物 开发洁净能源减少环境污染 繁殖优良家畜品种及濒危动物 是指依据细胞全能性原理，在无菌条件下，分离植物器官、组织、细胞或原生质体（称为外植体），并在培养基上培养，在适宜的条件下使其长成部分或完整植株的技术 植物组织培养 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 1）外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等） 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿上 3）切取所需的外植体 4）将外植体接种于培养容器的培养基上 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！ 植物组织培养的培养基 定义：含有一定营养成分，供组织培养植物生长的基质 水 无机营养成分：C，H，O大量元素及部分微量元素 有机营养成分（主要有糖、维生素和氨基酸） ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 生长激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 琼脂：起支持作用 PH值：5.0－6.0 植物组织培养中激素的应用 脱分化中，细胞分裂素与生长素浓度比值适中，促进愈伤组织的形成 再分化中，当细胞分裂素与生长素浓度比高时，有利于芽的分化，浓度比低时，有利于根的分化。 概念： 是将组织培养过程中形成的愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中，进行悬浮培养，得到分散游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术。 细胞培养的目的： 通过大规模的细胞培养以获得人类所需的细胞次生代谢产物。 （一）植物繁殖新途径 （二）作物的新品种培育 （三）细胞产物的工厂化生产 （6）优点： 后代无性状分离，保持优良特性 不受季节、气候和地域的限制 易于储藏和运输 1、植物体细胞融合完成的标志是 A．产生新的细胞壁 B．细胞膜发生融合 C．细胞质发生融合 D．细胞核发生融合 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 3.动物细胞生长特性： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 动物细胞的培养过程 思考讨论：在动物细胞培养过程中， 为什么要用胰蛋白酶对取出的动物 组织进行处理？ 有关概念: 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞然后配制成一定浓度的细胞悬浮液，再将悬浮液放入培养瓶中培养初次培养称为原代培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 有关概念 植物组织培养和动物细胞培养的比较 思考下列问题： 1、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢？ 2、动物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？ 3、动物细胞融合与植