力达霉素诱导肿瘤细胞周期阻滞的分子机制和其信号传导通路研究.pdfVIP

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2016-06-13 发布于安徽
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力达霉素诱导肿瘤细胞周期阻滞的分子机制和其信号传导通路研究.pdf

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中国医学科学院中国协和医科大学博士论文英文缩略语英文缩写英文全称中文全称 MAPK kinase 有丝分裂原激活蛋白激酶 rnitogen—activatedprotein nlin m抽ute 分钟 MPF IIlitotic factor 有丝分裂促进因子 promating PAGE polyacryl眦idegelelec仃ophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBs bu彘redsaline 磷酸盐缓冲液 phosphate PI iodide 碘化吡啶 propidium PVDF difluoride 聚偏二氟乙烯 polyVinylidene shRNAshort 短发夹核糖核酸 hairp血RNA SDS sodium sulphate 十二烷基磺酸钠 dodecyl TBS—T乜risbufferedsaliIle1、Ⅳeen 吐温．Tris盐缓冲液 Tris 三羟甲基氨基甲烷 trishydroxymetllylanlmomeⅡlane 5一溴一4一氯一3一吲哚一B_D．半乳 X-gal 5一bmmo-4-chlom一3一indolyl一D—Galactopyra noside 糖苷 4 国医学科学院中国协和医科大学博士论文中文摘要中文摘要 c一1027)。其分族成员之一，分离自我国的一株链霉菌(＆，印加∞E甜gzD绷咿DⅢ5 子由一个酸性的辅基蛋白和一个发色团结合而成，发色团是LDM的主要活性部分，起着直接断裂DNA的作用，而辅基蛋白的主要作用是保护发色团。以往研究表明，u)M具有高度的抗肿瘤活性，目前正进行临床I期试验。作为DNA损伤剂，LDM可以诱导细胞周期阻滞、凋亡和裂亡。但是LDM诱导周期阻滞的作用机制及其信号传导通路到目前为止还未进行过详细研究。本研究的目的是阐明 LDM诱导周期阻滞的分子机制及信号调节通路，从而为LDM的临床应用提供更深入的理论依据和治疗方案。一、LDM诱导人乳腺癌细胞周期阻滞的作用 1．MTT法检测LDM对MCF．7细胞的增殖抑制作用与药物作用时间的关系。结果显示不同的给药时间对Ic50值无明显影响，分别为O．46±O．14 nM、0．32+0．12 nM、0．24+o．08nM和O．48+o．1l 的能力与药物暴露时间无关。 2．生长抑制实验结果表明LDM作用24h，再撤去药液继续培养3天，MCF．7 和MCF．7／DOx细胞的生长被明显抑制，当浓度为0．1nM时，对两种细胞的生长样敏感。 3．流式细胞仪结果显示LDM对MCF．7细胞的周期调节作用与浓