建立斑马鱼野生型品系鉴定标准和寻找暨初步分析斑马鱼长非编码RNA.pdf

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中困医学科学院北京协和医学院硕上研究乍毕qk论文 目录 目j5iE……………………………………………………………………………………………………………………………………l 利用微卫星分子标记建屯斑马鱼野生型品系鉴定标准…………………………………………….3 摘 要………………………………………………………………………………………………………………………………3 Abstnlct…………………………………………………………………………………………………………………………………4 前 言………………………………………………………………………………………………………………………………….5 实验材料及方法………………………………………………………………………………………..7 一、实验材料……………………………………………………………………………………7 1.主要器材…………………………………………………………………………………7 2.主要试剂…………………………………………………………………………………7 3.实验动物…………………………………………………………………………………7 二、实验方法…………………………………………………………………………………….8 1.斑马鱼基因组的提取……………………………………………………………………8 2.利用PCR实验检测4种不同品系斑马鱼基凶组中微卫星标记的差异………………9 3.电泳检测PCR产物……………………………………………………………………。9 结果与分析……………………………………………………………………………………………10 讨论………………………………………………………………………………………………………………………………..1:: d、 结………………………………………………………………………………………………………………………………..1:: 参考文献~……………………………………………………………………………………………l3 寻找暨初步分析斑马鱼长非编码RNA………………………………………………………………14 摘 要………………………………………………………………………………………………………………………………。l4 Abstr2lct……………………………………………………………………………………………………………………………….15 前言………………………………………………………………………………………………………………………………….16 实验材料及方法……………………………………………………………………………………一19 一、实验材料……………………………………………………………………………………19 1.主要器材………………………………………………………………………………。19 2.主要试剂………………………………………………………………………………..20 l 3.实验动物……………………………………………………………………………….2 4.载1本…………………………………………………………………………………………………………………2l 二、实验方法…………………………………………………………………………………。2l 1.通过牛物信息学技术筛选mRNA.1ikencRNA候选基因……………………………。2l 2.提取斑马鱼的总RNA…………………………………………………………………..23 3.斑马鱼RNA逆转录为cDNA……………………………………………………………25 4.以斑马鱼cDNA混合液为模板PCR测试各个ncRNA基因………………………..25 5.ncRNA基因的PCR产物的凝胶回收…………………………………………………26 6.载体pBs.TII片段连接与转化………………………………………………………。27 7.检测产物片段是否为目的片段………………………………………………………~28 8.使用l玎.PCR半定量检测ncRNA基凶在斑马鱼胚胎发育过程中的各个时期的表达 水。1

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