骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注神经功能和形态学影响的初步研究.pdf

摘要 背景：脑粗管疾病(cerebrovasculardisease，CvD)是人类疾病的三大 死亡原因之‘。急性起病，迅速出现局限性或弥漫性脑功能缺失征象 的腑血管性临床事件称“卒中”(stroke)，其中60—70％为缺血性卒L卜|， 刚恼梗夕E(cerebral 活的神经元。但当前临床常规治疗效果不理想。最近的研究表明，细 胞移植治疗神经系统疾病是一种有前景的治疗方式。迄今已经有多种 类型的干细胞应用于脑缺血的实验研究，其中，骨髓间质细胞fbone marrowstromal 势。例如，BMscs易于获取、分离、纯化、培养，并具有较强的分 化潜能，体内或体外实验提示可向多种组织分化。研究表明BMSCs 移植nJ‘以改善动物脑缺血神经功能损伤的程度。此外，亦有研究证实 BMSCs町以穿越血脑屏障、并在脑组织。卜I迁移，分化为胶质细胞和 神经元。现在，有诸多实验室正在致力_丁IBMscs移植治疗脑缺札的 研究，但仍停留在行为改善的水平，而缺乏生理功能的改善的证据， 例如几乎没有研究发现分化后的神经细胞突触发生；亦有观点认为， 其更重要的作用在于与生物活性物质的交互作用。本研究拟以 BMSCs脑皮层立体定向注射的方式，观察其对脑缺血的治疗作用和 可能的机制。 cerebmlocclusion， 方法：制作大鼠脑缺血再灌注模型(111iddleaneu MCA0)，立体定向脑实质注射骨髓间充质干细胞。并进行以下方面 的研究： 1．人源细胞移植组及对照组行如下测试 (1)行为学测试，包括神经学严重性评分(Neurologicalseverity scores，NSS)、转棒实验、MoHis水迷宫、粘贴试验。 (2)免疫组化分析血管内皮生长冈子(VEGF)、微血管密度(MVD)。 2．鼠源细胞移植组及对照行如卜-测试 (1)脑梗死体积比例分析。 blood (2)对血肺屏障(brainbarrier，BBB)恢复程度的影响。 结果： 1．人源细胞移植组及对照组： (1)行为学测试，转棒试验治疗组显著优于对照，NSS评分及迷宫速 度无显著差异，余项于约第15—25大问的观察点观察到治疗后改善。 (2)免疫组化：移植组较对照组观察到强|；¨J性vEGF表达细胞；微血 管密度差别试分析，t检验，p=O．055。 2．鼠源细胞移植组及对照组： (1)脑梗死体积比例统计，组间t检验，p=0．545。 (2)血脑屏障，左脑移植、对照组间比较，移植组平均染料含量低于 对照，p0．05：右脑移植、对照组间比较，p=0．683。 结论： (1)行为学改善，治疗作用主要体现在术后约第15—25天。 (2)免疫组化提示移植可能对VEGF表达、微血管密度有促进作用。 (3)BMSCs移植对脑梗死体积无显著影响。 (4)BMSCs移植对McAo后血脑屏障的恢复无显著影响。 关键词 骨髓问充质干细胞；大脑中动脉梗塞；行为学；血管内皮 生长因子；微血管密度；血脑屏障；细胞治疗 Abstract and Backgroundpurpose thethree reasonsofthe Thecerebrovascular oneof major disease(cVD)is eVent．60—70％casesare death．Strokeis anacuteelement people’s ofme ishow the clinical cerebralinf缸ction(CI)．Nowemphases therapy suⅣivalsinischemic clinical toretrie