菊花的组织培养—Alan分析.pptVIP

二、影响植物组织培养的因素 1、材料的种类、年龄及保存时间长短等 2、营养 3、植物激素 4、PH、温度、光照等条件 3、植物激素的影响 常用植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向 课题一 菊花的组织培养 有丝分裂 受精卵 细胞分化 1、细胞分化的概念 一、知识回顾 细胞分化是否意味着细胞中遗传物质的改变？ 红细胞 合成血红蛋白 (不合成肌动蛋白) 肌细胞 肌动蛋白基因开启 合成肌动蛋白 (不合成血红蛋白) 肌动蛋白基因关闭 血红蛋白基因关闭 血红蛋白基因开启 细胞全能性 是不是所有的植物细胞都具有全能性？ 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 植物组织培养的基本过程 脱分化（或去分化）：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。 外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。　 愈伤组织：细胞排列疏松、无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。 愈伤组织 细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 1、植物材料的选择 ---直接关系实验的成败 ①不同植物的组织培养难度不同 eg：烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。 2、营养---MS培养基 A、大量元素: C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖 D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 Ｎ、Ｐ主要影响蛋白质、核酸的合成； K、 Ca、Mg、S主要影响酶的活性。 无机盐 蔗糖既是能源也是调节渗透压的物质 MS固体培养基成分及比例 　　微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 以下培养基出现的现象说明什么问题？ 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等。 细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－BA）、玉米素（ZT）等。 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 （二）外植体消毒 2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗 ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液 4、接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向，形态学上端朝上，形态学下端朝下，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分 思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ * 萧县郝集中学 * * 激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。