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原代细胞培训讲义 原代细胞简介 原代细胞培养 1 2 3 4 客户常见问题解答 目录 我们的产品优势 1 原代细胞简介 原代细胞,是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织等)剥离后,立即经蛋白酶或其它的方法处理,从而获得分散单个细胞并在体外进行模拟机体培养,由此获得的细胞称为原代细胞。 由于组织细胞离体时间短,最接近机体内细胞生长状况,基因完整性高,模拟机体自然反应最准确,用于药物测试及细胞分化研究等实验研究中结果更准确。 实验样本取材 漂洗 剪切 消化 制备单细胞悬液 接种 培养 2 原代细胞培养 原代细胞培养,是指直接从机体取下器官、组织细胞后立即进行培养,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质。实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养,常用的可分为组织块培养和分散细胞培养两种。 细胞生长密度不高时,不能急于传代培养 控制贴壁细胞的消化时间,在吹打已消化细胞时应减少机械损伤 针对不同细胞来源的细胞,要选择适合其生长的培养液 严格遵循无菌操作,避免污染 2 原代细胞培养 注意事项 3 我们的产品优势 质量 保证 出具公司质检报告;如有需要,可以提供细胞鉴定服务。 原料预处理问题 优质 服务 发货前拍照确保细胞状态良好,客户收到细胞后连续三天拍照,据此评估细胞质量,若出现问题可按客户要求做出相应处理。 4 客户常见问题解答 原代细胞与细胞株、细胞系的关系问题 4 客户常见问题解答 细胞传代与细胞冻存及复苏的关系问题 4 客户常见问题解答 细胞生物学相关实验 细胞检测 细胞分离培养 其他 细胞周期检测、增殖检测 细胞凋亡检测 细胞迁移检测、粘附性检测 细胞原代培 养、传代培养 细胞信号转导研究等 细胞模型构建 细胞流式分选、磁珠分选 细胞成分提取 组织细胞分离 细胞毒性测试 DNA、RNA的 分离提取 蛋白质、磷脂 的分离提取 4 客户常见问题解答 细胞培养用途 药物作用机理研究、基因功能研究、疾病发生机理研究等 新药筛选、抗体制备、疫苗研发等 疫苗生产、基因工程药物生产、单克隆抗体生产等 基础研究 药物研究开发 生物制药生产 4 客户常见问题解答 原代细胞的传代问题 针对不同类型的原代细胞,传代代数会有所不同。通常情况下,上皮类细胞可以传2~3代,平滑肌类细胞可以传5~8代,成纤维类细胞可以传10代左右。其他比较特殊的细胞,如神经元细胞,食道上皮细胞等,通常只能传2代。 注意传代阶段的选取,通常80%汇合的细胞为比较理想的传代阶段,且整个操作中应注意保持无菌条件,避免污染。 4 客户常见问题解答 原代细胞的数量控制问题 在细胞培养过程中,从开始在一个瓶中培养的原代细胞增殖到一定程度产生接触抑制时,就需要分装到不同瓶中进行培养,通常采用一分二的方法,将一瓶高密度的 细胞分装成两瓶继续培养。 4 客户常见问题解答 获得途径及周期问题 通常采用密度梯度离心的方法从组织中获得目的原代细胞,由于原代细胞的来源及组织采样部位的差异等原因,获得原代细胞的周期会有所不同,要视具体情况而定。比如,人源正常细胞由于样品源比较难获得,鼠眼角膜细胞由于取样操作比较困难,可能会导致货期的延长,通常情况下鼠源细胞及人源肿瘤细胞货期为2周左右,人源正常细胞货期为4周左右。 4 客户常见问题解答 其它常见问题 原代细胞的包装 采用T25细胞瓶,密封良好,且外包装采用泡沫缓冲材料固定,确保 细胞瓶平稳、不晃动,为运输途中的细胞质量提供了保证。 * * * * * *
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