体液蛋白质检验解析.pptVIP

临床意义 营养不良（敏感指标） 肝功能不全（敏感指标） 急性炎症、恶性肿瘤、创伤等 肾炎 BCG法测定血清白蛋白 原理： 评价及应用： 本法操作简便、快速，胆红素、溶血和中度脂血无干扰。既可手工操作，也能自动化分析，是目前测定白蛋白最常用方法。 与溴甲酚紫法比较，对白蛋白特异性稍差。 操作步骤 1.薄膜准备 在无光泽面一端1.5cm处划横线作点样标记，然后将薄膜放进缓冲液中充分浸透 2．点样 垂直、均匀、适量 3．平衡 无光泽面向下，点样线置于负极，平直贴于电泳槽支架两端约5min 4．电泳 120V×45min 5．染色 氨基黑10B染色液中染色5～10min 6．漂洗 漂洗液中反复漂洗直至背景漂白为止 7．定量 （1）洗脱比色法： 剪下各区带放入相应试管，另从空白背景处剪一条与白蛋白区带等宽的膜条放于空白管 于白蛋白管内加入0.4mol／L NaOH 6ml，其余5管加3ml，置 37℃水浴20分钟（不时振荡） 用波长620nm比色，以空白管调零读各管吸光度。 （2）光密度计扫描法： 透明：将薄膜浸入透明液23min，贴于载玻片上，烘干，冷却 将已透明的薄膜放入光密度计扫描分析 计算 AT=AAlb×2+Aα1+Aα2+Aβ+Aγ 血清蛋白各组分的相对百分数Alb%= AAlb×2/ AT×100% α1%= Aα1/ AT×100% α2%= Aα