细胞工程一轮复习解析.pptVIP

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细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂,形成完整的杂交细胞 诱导的手段? 融合后细胞的类型? AB杂种细胞遗传物质 有什么特点? 三种AA、AB、BB(A、B) 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 原理? 1.2动物细胞融合过程 为什么灭活的病毒能作诱导剂? 灭活丧失感染性 保留融合活性 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体 细胞杂交 细胞膜的 流动性 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和,获得 杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的 流动性 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外,还有 灭活病毒 获得杂种细胞、制备 单克隆抗 体 1.4 比较动、植物细胞杂交技术 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点: 产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。 单克隆抗体! 读下面一段资料,找出单克隆抗体的概念 人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。 2.1单克隆抗体的概念 单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案: 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体, 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 ①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白? ② 会有几种融合方式? ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的?有何特点? ④ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体? ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体? BB 、B瘤 、瘤瘤 (B、瘤) (一选)选择性培养基:只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B细胞 (二选):选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点:既能产生特异性抗体,又能大量增殖。 单克隆抗体 筛选 杂交细胞 杂交瘤细胞 体外或体内 细胞培养 筛选 骨髓瘤 细胞 诱导细胞融合 特异性杂交瘤细胞 杂交瘤细胞系 提取 经过免疫的 B淋巴细胞 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 单克隆抗体的制备过程: 特点:既能产生专一抗体又能大量繁殖 特点:特异性强灵敏度高可大量制备 注射抗原 免疫 单抗制备过程分哪几步?请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是? 2.3单克隆抗体的应用 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。 (2012新课标卷)40、[生物—选修3现代生物科技专题](15分) 根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有    和    。 黏性末端 平末端 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下: 为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是    。 切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即     DNA连接酶和   DNA连接酶。 E.Coli T4 (5)基因工程中除质粒外,     和       也可作为运载体。 (4)反转录作用的模板是    ,产物是    。 若要在体外获得大量反转录产物,常采用   技术。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 mRNA(或RNA) cDNA (或DNA) 噬菌体 未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 PCR 动植物病毒等 4、【生物-现代生物技术专题】 为扩大可耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 (1)获得耐盐基因后,构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处,DNA连接酶作用于 处。(填“a”或“b”) (2) 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方

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