第四生物反应器分析.pptVIP

微生物与动植物细胞之间的差异 项目 微生物细胞 哺乳动物细胞 植物细胞 大小（直径） 1~20μm 10~100μm 10~100μm 在液体中生长 悬浮生长，有时聚集成团 有些可悬浮生长，多数依靠表面 可悬浮生长，聚集成团 营养要求 简单 极复杂 复杂 生长速率 一般较快，倍增时间0.5~5h 慢。倍增时间15~100h 慢，倍增时间24~74h 代谢控制 内部控制 内部 激素 内部 激素 对环境的敏感性 一般耐受范围大 无细胞壁，对环境极敏感 耐受范围较大 细胞分化 无 有 有 对剪切的敏感性 低 极高 高 　　由于医疗卫生事业和农业的发展，对动植物细胞进行大规模的生产已经成为当前的迫切需要，大规模培养技术和反应器的开发，就是急需解决的关键课题。 　　培养动植物细胞的专用反应器也有很大发展，种类越来越多，规模也逐渐增大。这里仅仅就重要的几类反应器的结构与特性进行介绍。 一、动植物细胞悬浮培养生物反应器 　　有少数动物细胞，例如杂交瘤细胞和肿瘤细胞可以像微生物那样在通气搅拌灌内悬浮培养。但动物细胞缺少细胞壁的保护，液体的剪切力应小。 　特点：　a、搅拌转数低； 　　　　　b、通气方式独特。 二、动物细胞贴壁培养反应器 　　　大部分动物细胞是属于贴壁依赖性细胞，包括非淋巴组织的细胞和许多异倍体细胞。 这类细胞的特点是它需要附着在固体或者半固体的表面才生长，原来是圆形的细胞一经贴壁就迅速铺展，然后开始有丝分裂，并很快进入对数生长期。一般在数天后铺满表面，形成致密的细胞单层，所以贴壁培养又称为单层培养。 目前有不少生物制品厂是用4~30L 大小的滚瓶进行动物细胞贴壁培养来生产疫苗。 特点： a、结构简单，投资少，技术成熟 ； b、劳动强度大，单位体积所能提供的细胞生长的表面积小，按体积计算细胞产率低； c、检测和控制环境条件受到限制。 动物细胞用中空纤维反应器 　 该装置由中空纤维管组成，每根中空纤维管内径200μm。中空纤维的管壁是半透性的多孔膜。氧和CO2等小分子可以自由地通过膜双向扩散，而大分子有机物则不能通过。动物细胞贴附于中空纤维外壁生长，可很方便地获取营养物质和溶氧，生长面积与容积之比达40余倍，其溶氧传质速率也可达到0.6mmol/l·h，是大规模动物细胞培养的好方法。 三、动物细胞微载体悬浮培养反应器 　　 用微珠做载体，使单层动物细胞生长于微珠表面，并在培养液中进行悬浮培养。这种培养方式是将单层培养和悬浮培养相结合，这是大规模动物细胞培养的最有前途的方法。 　　微载体可用交联葡聚糖、纤维素、聚丙稀酰胺、明胶、硅橡胶做为基质而制成。 　　微载体球径约为40~280μm。其密度在1.03~1.05g/ml，以便在反应器内缓慢搅拌后，微载体能悬浮起来。 　　微载体悬浮培养可以采用多种反应器型式， 如气腔式反应器，流化床反应器。 流化床反应器 　　反应器内支持细胞生长的微载体呈流化状态。接种后不断提供营养成分，产物不断排出。安装了膜式气体交换器，提供高密度细胞需要的氧气，同时能及时排出CO2 ， 　　特点是可进行高密度细胞的培养。 采用微载体悬浮培养的优点： 1.单位体积具有的表面积大，如1.0g微载体，有的能提供5000~6000cm2的表面积，因此它的单位体积培养基的细胞产率高； 　　2.由于把悬浮培养和贴壁培养融合在一起，具有两种培养的优点，有利于培养环境条件的检测和控制，培养系统重现性好； 　　3.放大容易，现已经有用1000L的规模来生产β-干扰素用的二倍体细胞。 四、植物细胞培养和反应器 鉴于某些产物的唯一来源是植物，而有些植物从种植到收获花费时间过长，难以满足要求。采用大规模（plant cell culture techniche ）就可以直接快速生产这些产物。 日本专卖公司已经用21 m3的反应器进行烟草细胞的连续培养，细胞的生产率每日可达5.82kg/ m3 。日本三井石油株式会社用750L 植物细胞反应器生产染料紫草宁，已可满足国内需要量的43%。 植物细胞培养的特点： 1．生产速率慢； 2．有坚固的细胞壁，代谢产物不分泌到胞外而留在细胞内，因此要得到大量次级代谢产物，必须进行高密度培养。 method 收获时间 紫草宁浓度（干重） plant cell 2~3year 1~2g/kg plant cell culture 21d 14g/kg 植物细胞培养和从完整的植物生产紫草宁的比较 因此，利用植物细胞培养