正式论文 刘刚.docVIP

成石液：1%氯化铵和1%乙二醇溶液的配制应用电子天平称取氯化铵5g，用10mL规格的量筒量取5mL的乙二醇，同时用500mL的量筒量取500mL的自来水，一并倒入量杯中，并用玻璃棒混匀，倒入药瓶并标记[8]。 金钱草水提取物的制备：原料℃,0.08MPa真空干燥后，置于干燥器中备用）→水提→浓缩→浸膏→喷雾干燥→粉碎 1.2.3 动物饲养 大鼠饲养在苏州市新区枫桥净化设备厂独立送排风笼具(Individual Ventitaled Cage,IVC)~4h，121℃高温蒸汽灭菌20min，60℃干燥箱内鼓风干燥后备用。 成石组和金钱草组大鼠自由饮用配制好的成石液，对照组大鼠自由饮用自来水，都自由采食。环境温度20~24℃，湿度50~65%，光照12~13h，每周定期称重一次。大鼠给药采用灌胃方式，对照组和成石组灌胃生理盐水0.3g/kg，金钱草组灌胃金钱草水提取液0.3g/kg，在持续灌胃28天后称重并分别宰杀大鼠。试验过程中认真进行大鼠的一般检查记录大鼠的精神状态、采食、饮水、活动、临床症状、环境温度与湿度及通风等情况。 1.3 样品采集与处理 在4w时，大鼠禁食12h，不禁水过夜，逐只称重，采血后的大鼠立即解剖去左右两侧肾和脾脏，并称重，用滤纸吸去脏器表面血液，去除包膜，称量肾脏和脾脏绝对重量（湿重），并按下式计算肾脏和脾脏的相对重量（肾体比和脾体比）：脏体比量（%）=脏器湿重（g）/宰前活重（g）×100。脾、右肾用4％中性甲醛固定，乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋。IEICA-RM-2128型切片机切片5~7μm，HE染色，中性树胶封片，显微镜下对各组织切片进行观察，选取结构典型的切片用OLYMPUS-CH30显微摄影系统拍摄。 1.4 数据统计分析 所有试验数据均采用均数±标准差（M±SD）表示，P＜0.05差异显著，P＜0.01差异极显著。用spss17.0统计软件进行数据分析各数据之间的统计学差异。 2 结果 2.1 宰前活重和肾、脾脏指标的变化 表1 28d各组宰前活重和肾、脾脏指标的变化 组别 宰前活重（g）（）（%）±43.28 1.18±0.52 0.23±0.42 成石组 240.73±56.07* 1.32±0.57 0.26±0.12 金钱草组 216.85±39.65* 1.32±0.27 0.19±0.34 注：与对照组比较*表示P0.05，**表示P0.01；与成石组比较△表示P0.05，△△表示P0.01，下同 由表1可以看出，与对照组相比，成石组肾体比差异不显著(P＞0.05)，脾体比差异也不显著(P＞0.05)，成石组的宰前活重与对照组相比有所下降，并且差异显著（P＜0.05）；金钱草组宰前活重和与对照组相比有所降低，并且差异显著（P＜0.05）,但肾体比和脾体比差异都不显著（P＞0.05）；金钱草组和成石组相比，肾体比差不多，脾体比有所降低，但差异都不显著（P＞0.05）。 2.2 各组肾、脾脏切片观察 图1 对照组大鼠肾脏组织切片（HE，100×）图2 对照组大鼠肾脏组织切片（HE，100×） 图3 成石组大鼠肾脏组织切片（HE，100图4 成石组大鼠肾脏组织切片 （HE，100×） 图7 金钱草组大鼠肾脏组织切片（HE，100×） 图8 金钱草组大鼠肾脏组织切片（HE，100×） 图7 对照组大鼠脾脏组织切片（HE，100×） 图8 对照组大鼠脾脏组织切片（HE，100×） 由上图所示，对照组图1中肾小管排列紧密，细胞分布均匀，图2肾小球细胞核完整，与周围界限明显；成石组图3中大鼠肾脏切片能明显看见肾远曲小管（A）中存在不规则的晶体和规则的四方形晶体（二水合草酸钙）肾小管扩张，管壁破裂细胞核不完整，图4中可见肾小球细胞核破裂，囊肿，肾小管排列疏松，同时可见上皮细胞损伤，变性，脱落。由于尿酸不但可通过干扰尿液中酸性粘多糖(GAGs)的抑制活性引起草酸钙晶体沉积，而且尿酸晶体及尿酸结石碎片可以通过异相成核过程诱导草酸钙形成和生长，因此，尿酸晶体常会与草酸钙晶体互为附生生长，故而影像中可见。成石组图3、4与对照组图1、2比较，成石液对大鼠肾脏有损害作用，肾小球萎缩或囊腔水肿，