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第二章 酶工程基础 一、酶的基础知识 二、酶催化原理 三、酶催化反应动力学 四、酶的生产 第一节 酶的基础知识 一、传统定义 二、习惯归类 三、酶的分类与命名 第一节 酶是什么? 一、传统定义: 酶是一类生物催化剂,化学本质是蛋白质,具有下列性质: a)是高分子胶体物质,两性电解质,在电场中泳动。 b) 紫外,热,表面活性剂,重金属,酸、碱使酶失活 c) 酶被蛋白酶水解而失活 d) 酶由蛋白质或蛋白质+小分子(Vb,辅酶等) 二、习惯归类 1 单体酶和寡聚酶 2单纯酶和结合酶 辅助因子 无机离子 有机化合物: 辅基(cofactor) 辅酶(coenzyme) 小分子的有机化合物,耐热,不受蛋白变性剂的破坏; 象底物一样参与反应,并在反应中发生变化; 许多辅酶是B族维生素的衍生物。 3 恒态酶和调节酶 恒态酶(static enzyme): 构成代谢途径和物质转化体系的基本组成成分,在细胞中的含量相对恒定,其活性仅受反应动力学系统本身的组成因素调节。 调节酶(regulative enzyme):代谢途径和物质转化体系中起调节作用的关键酶,它们的含量与活性常因机体的机能状况而不同。 调节酶按照其活性调节方式又可分为 1) 潜态酶:酶原和共价修饰处于非活性状态的酶。 2) 别构酶:酶结构上除了有能与底物结合、并催化反应的活性中心外,还有能和效应物结合的调节中心。 3) 多酶融合体:指一条多肽链上含有两种或两种以上催化活性的酶,如大肠杆菌天冬氨酸激酶,同时具有高丝氨酸脱氢酶的活性。 4 多酶复合物(multienzyme complex) 或多酶系统multienzyme system) 多种酶组分集合在一起,一般催化连续的多个相关的反应 5 胞内酶、胞外酶 在合成分泌后定位于细胞内发生作用的酶,大多数的酶属于此类。 在合成后分泌到细胞外发生作用的酶,主要为水解酶。 6 酶的多形性与同工酶 酶的多形性 结构、组成和物理化学性质有所不同,但是可以催化相同的反应. ?同工酶 存在于同一生物体中,催化相同反应,但结构基因不同、理化性质有所不同的一类酶 三、 酶的命名与分类 1961年国际酶学委员会提出了给酶进行命名和分类。 1961年, ~712种, 1964年,~870种, 1972年, ~ 1770种, 1975年,~1974种, 1978年, ~2120种, 1984年,~2470种 1990年, ~3000种, 1992年,~3200种 1997年, ~3700种 1961年以前 1. 根据酶作用的底物命名( 淀粉酶,蛋白酶) ; 2. 根据酶催化反应的性质及类型命名( 转氨酶,脱氨酶) 有的酶结合上述两个原则来命名(乳酸脱氢酶 ),或再加酶的来源或性质特点(胰蛋白酶;碱性磷酸酯酶) 习惯命名比较简单,应用历史较长,尽管缺乏系统性,但现在还被人们使用。 以酶的整体反应为基础,明确标明酶的底物及催化反应的性质。 ××底物:××底物+××反应类型+酶 单底物:底物 + 反应类型 + 酶 D-氨基酸 + 氧化还原 + 酶---→D-氨基酸氧化酶 双底物:底物:底物 + 反应类型 + 酶 醇+NAD++氧化还原+酶---→醇:NAD+ 氧化还原酶 根据酶催化作用类型,把酶分成6大类 用四个数字(标码)标记每一种酶 EC-----Enzyme Commision EC 1.1.1.1 醇脱氢酶 第一大类, 作用CHOH, 以 NAD+ ,NADP+为受体 编号 酶委员会建议,在发表论文时,论题有关的主要酶在第一次提到时应写出它的标码系统名称、习惯命名和来源,然后再用系统命名和习惯命名叙述。 水解酶催化底物的加水分解反应。 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 例如,脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应: 氧化-还原酶催化氧化-还原反应。 主要包括脱氢酶(dehydrogenase)和氧化酶(Oxidase)。 如,乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。 转移酶催化基团转移反应,即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。例如, 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。 裂合酶催化从底物分子中移去一个基
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