02 血清总蛋白浓度测定.pptVIP

* 河南科技大学医学院 生物化学与分子生物学教研室 血清总蛋白浓度测定 (双缩脲法) 【目的】 【目的】 掌握双缩脲法测定血清总蛋白的原理。 熟悉操作过程及其临床意义。 一、原理1. 双缩脲反应 双缩脲反应 在碱性溶液中，双缩脲与碱性硫酸铜反应形成紫红色化合物。此反应称为双缩脲反应。 2. 蛋白质与双缩脲试剂反应 蛋白质与双缩脲试剂反应 操作 取三支试管，分别标明测定管、标准管和空白管，然后按下表加样。 混匀，置25℃水浴箱30分钟(或37℃水浴箱10分钟)，取出后在波长540nm处，用分光光度计进行比色，以空白管调零，读取各管吸光度值。 【计算】 血清总蛋白(g/L)＝A测/A标×标准总蛋白浓度(g/L) 【操作】 【参考值】 60~80 g/L 试剂(ml) 测定管 标准管 空白管 血清标本 50?l － － 标准血清(70.0g/L) － 50?l － 生理盐水 － － 50?l 双缩脲试剂 3.0 3.0 3.0 临床意义 【临床意义】 1. 血清总蛋白浓度增高常见于： 血清水分减少，而使总蛋白浓度相对增高。如：呕吐、腹泻等。 血清蛋白质合成增加。大多发生在多发性骨髓瘤患者，此时主要是球蛋白增加。 结核病、疟疾播散性红斑狼疮、风湿热等，可引起球蛋白增加。 2. 血清总蛋白浓度降低常见于： 血清中水分增多，血清被稀释。如静脉注射过多低渗溶液或因各种原因引起的水钠潴留。 营养不良和消耗增加，长期食物中蛋白质含量不足，或慢性肠道疾病引起吸收不良，使体内缺乏合成蛋白质的原料；或因长期患消耗性疾病，如严重结核病、甲状腺机能亢进或恶性肿瘤等，均可造成血清总蛋白浓度降低。 合成障碍，主要是肝功能障碍。 蛋白质丢失。严重灼伤，大量血浆渗出，或大出血时，大量血液丢失；另外，肾病综合症及溃疡性结肠炎可从尿液或粪便中丢失蛋白质。 实验二 血清总蛋白浓度测定(双缩脲法) 【目的】 【原理】 【操作】 报告 加入物(ml) 测定管 标准管 空白管 待测血清 50?l － － 蛋白标准液(70.0g/L) － 50?l － 蒸馏水 － － 50?l 双缩脲试剂 3.0 3.0 3.0 混匀。37℃水浴10min后，540nm波长比色。 【结果记录】 A测定＝ A标准＝ C标准＝ 【计算】 血清总蛋白(g/L)＝A测/A标×标准总蛋白浓度(g/L) 【结果分析讨论】 【临床意义】 实验时间： 带课教师： 批阅时间： 成绩： . * * 河南科技大学医学院 生物化学与分子生物学教研室 *