微生物工程复习提纲。。。。。。.doc

微生物工程复习提纲（2013.6.4） 绪论 微生物工程？微生物工程是渗透有工程学的微生物学，是发酵技术工程化的发展。 生物工程包括：微生物工程，细胞工程，基因工程，酶工程。 简述微生物工程的特点？（参考课件自己归纳总结） 答：微生物工程是生物技术的重要组成和基础，是生物技术产业化的重要环节。它将微生物学、生物化学和化学工程的基本原理有机结合起来，广泛而深入地揭示了发酵过程的本质。 简述微生物工程的主要内容？（参考课件自己总结） 答：生产菌种的选育、发酵条件的优化与控制、反应器的设计及产物的分离、提取与精制等。 第一章 微生物基础知识 1、简述微生物的五大共性？要点：体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多。 原核微生物主要有：细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体 3、细菌的形态十分简单，基本上只有球状、杆状和螺旋状三大类。 4、芽孢：某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢。 5、微生物的六种营养素？ 答：碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。 生长曲线？典型的生长曲线包括哪几部分？各部分特点（结合第五章分批发酵动力学总结） 答：（1）生长曲线：当我们把少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中后，在适宜的温度、通气（厌氧菌则不能通气）等条件下，它们的群体就会有规律地生长起来。如果以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就可以画出一条有规律的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。（2）典型的生长曲线包括：延滞期、指数期、稳定期和衰亡期等四个时期 。（3）各部分的特点：延滞期（lagphase）又称停滞期、调整期或适应期。指少量微生物接种到新培养液中后，在开始培养的一段时间内细胞数目不增加的时期。该时期有几个特点：①生长速率常数等于零。②细胞形态变大或增长：许多杆菌可长成长丝状。③细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。④合成代谢活跃，核糖体、酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。⑤对外界不良条件例如NaCl溶液浓度、温度和抗生素等化学药物的反应敏感。指数期又称对数期，是指在生长曲线中，紧接着延滞期的一个细胞以几何级数速度分裂的一段时期。指数期有以下几个特点：①生长速率常数R最大，因而细胞每分裂一次所需的代时G（增代时间）或原生质增加一倍所需的倍增时间最短；②细胞进行平衡生长，菌体内各种成分最为均匀；③酶系活跃，代谢旺盛。稳定期又称恒定期或最高生长期。其特点是生长速率常数R等于0，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等，或正生长与负生长相等的动态平衡之中。这时的菌体产量达到了最高点 。在稳定期时，细胞开始贮存糖原、异染颗粒和脂肪等贮藏物；多数芽孢杆菌在这时开始形成芽孢；有的微生物在稳定期时还开始合成抗生素等次生代谢产物。衰亡期，在衰亡期中，个体死亡的速度超过新生的速度，因此，整个群体就呈现出负生长（R为负值）。这时，细胞形态多样，例如会产生很多膨大、不规则的退化形态；有的微生物因蛋白水解酶活力的增强就发生自溶；有的微生物在这时产生或释放对人类有用的抗生素等次生代谢产物；在芽孢杆菌中，芽孢释放往往也发生在这一时期。 第二章 工业微生物菌种选育和保藏 1、微生物工程工业生产水平的三个决定要素: 生产菌种的性能，发酵和提取工艺条件，生产设备。 2、分离与筛选菌种的具体做法一般分4个步骤：样品采集、增殖培养、纯种分离、生产性能测定 3、诱变育种：诱变育种就是人为地利用物理或化学等因素，使诱变对象细胞内的遗传物质发生变化，引起突变，并通过筛选获得符合要求的变异菌株的一种育种方法。 4、说出几种菌种保藏的方法。 答：（1）、斜面冰箱保藏法 4 ?C ； 3-6个月 （2）、沙土管保藏法 产孢子或芽孢微生物，1年 （3）、菌丝速冻 甘油或二甲基亚砜作为保护剂，-20 ℃ （4）、石蜡油封存法 1年左右 （5）、真空冷冻干燥保藏法 任何微生物；一般5年以上 （6）、液氮超低温保藏法 -196℃ ；保护剂；保存期长 第三章 发酵工业培养基的设计 1、简述培养基的成分及类型？（p54） 答：培养基类型：（1）．根据来源可分为天然、合成和半合成培养基。（2） 按状态分为：液体培养基、固体培养基、半固体培养基。（3） 按用途分类——孢子培养基、种子培养基和发酵培养基。（4）．根据使用目的可分为基础培养基、增殖培养基、鉴别培养基和选择培养基。 培养基成分：碳源、氮源、无机盐、微量元素、水和其他（生长因子，前体，产物合成促进剂，消泡剂等）。 试述工业发酵培养基设计的原则？（p45） 答：（1）、菌体的同化能力。（2）、代谢的阻遏和诱导。（3）、合适的碳氮比