细胞生物学荧光染色实验.pptVIP

单成彬制作 五、荧光的细胞化学测定 一、实验目的 学习荧光显微镜的使用，了解荧光显微技术原理和方法，以及荧光技术在细胞化学方面的应用。 二、实验原理 荧光显微技术是利用短波光照射被射物质，以激发其发射荧光而在荧光显微镜下可以检视的方法。 荧光又可分为：自发荧光和次生荧光。自发荧光是指有些生物体受到短波光照射后，直接发出的荧光。如经紫外光照射后，叶绿体发出的红色荧光；木质素发出的黄色荧光等。次生荧光是指有些生物材料受到短波光照射后并不发光，但当它吸附荧光染料后，也同样产生荧光，这种荧光也称间接荧光。 作为荧光的激发光源可分别采用紫外，紫、蓝、绿等波段的光；而获得的荧光为紫、蓝、绿、黄、橙、红等波段的光。不同生理活性的细胞，发射荧光(或次生荧光)的能力有很大差别，不同组份对荧光染料反应产生的荧光颜色也不同，所以利用这一特性，通过荧光显微镜可以测定某些组分的含量。以及细胞的生理活性。 三、实验用品 (一)材料：洋葱 (二)用品：荧光显微镜，载玻片，镊子，烧杯等。 (三)试剂： (1) O.01％ 吖啶橙生理盐水溶液 (2) O.02％ 异硫氰酯荧光素生理盐水溶液 (3) O.Ol％ 罗丹明生理盐水溶液 (4) 荧光增白剂溶液，将荧光增白剂溶于0.4