2013年高考生物最后冲刺复习课件（考纲快讯+热点考题+三年真题+考点清单）：专题二十一 基因工程（94张ppt）.pptVIP

【解析】本题主要考查基因工程和胚胎工程技术。 (1)获取卵母细胞的途径：①从活体输卵管中采集，②从已处死的雌鼠卵巢中获取。 (2)题干中论述：利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠，所以推测目的基因为与高血压相关的基因，质粒为载体，两者必须用相同的限制性核酸内切酶切割，有相同的黏性末端，才能连接，能被限制性核酸内切酶切割，是因为具有限制性核酸内切酶的切割位点。 (3)如果检测到相应蛋白质，即可在分子水平进行检测目的基因是否表达，如果检测已患高血压，即可在个体水平进行检测目的基因是否表达。 (4)在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。 答案：(1)卵巢 (2)目的基因 载体 同一种限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶的切割位点 (3)检测到相应蛋白质 出现高血压 (4)体外受精 12.(2009·福建高考) 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ等四种限制酶切割位点。请回答： 答案：(1)磷酸二酯 肽 (2)专一性 (3)限制性核酸内切 (4)启动子(或转录起始区) (5)A、C、D 5.(2010·江苏高考)下表中列出了几种限制酶(限制性核酸内切酶)识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： (1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有_____ _______个游离的磷酸基团。 (2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越___________。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是__________________________________________。 (4)与只使用EcoR Ⅰ相比较，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA的优点在于可以防止______________ ____________________________________________________。 (5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入__________酶。 (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______________ ____________________________________________________。 (7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在________ ___________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 【解题指南】解答本题的关键是明确以下三点： (1)限制酶识别特定DNA序列、并在特定位点上进行切割； (2)DNA连接酶是将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子，不需要模板； (3)载体的结构特点必须具备多个限制酶切割位点、复制原点、标记基因等。 【解析】本题考查基因工程中限制酶的作用特点。 (1)质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。从图1可以看出，质粒上只含有一个SmaⅠ的切点，因此被该酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团。 (2)由题目可知，SmaⅠ识别的DNA序列中只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成两个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多，热稳定性就越高。 (3)质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图2可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaⅠ酶切位点，都可以被SmaⅠ破坏，故不能使用该酶剪切含有目的基因的DNA。 (4)若只使用EcoR Ⅰ，则质粒和目的基因两端的黏性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身的连接产物，而利用BamH Ⅰ 和Hind Ⅲ剪切时，质粒和目的基因两端的黏性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物。 (5)质粒和目的基因连接后获得重组质粒，该过程需要连接酶作用，故混合后加入DNA连接酶。 (6)质粒上的抗性基因为标记基因，用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞。 (7)将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作为惟一碳源的培养基培养受体细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的细胞因不能利用碳源而死亡，从而达到筛选目的。 答案：(1)0、2 (2)高 (3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 (4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)DNA连接 (6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 (7)蔗糖为惟一碳源