2014-2015学年高中生物（人教版）精品课件系列：选修1专题3课题2月季的花药培养4.pptVIP

* 课题2 月季的花药培养 专题3 植物的组织培养技术 专题3 植物的组织培养 生物选修1 花的结构 课题背景 植物的花药培养在育种上有什么意义？ 花粉粒（1N） 单倍体植株（1N） 二倍体纯合子植株（2N） 缩短了育种周期，为新品种的培育开辟了新途径。 一、被子植物的花粉发育 花粉： 花丝 花药 雄蕊 囊状结构，内有很多花粉粒 雄蕊 花粉囊 当花粉囊的壁组织逐步发育分化时，会形成大量的花粉母细胞（小孢子母细胞）。 花粉 花粉粒是由花粉母细胞经过减数分裂而形成，因此，花粉粒是单倍体的生殖细胞。 被子植物花粉的发育要经历： 四分体时期、单核期和双核期等阶段。 花粉发育 花药横切 花粉囊 小孢子母细胞 1 个小孢子 [单核居中期] 1 个小孢子 [单核靠边期] 4 个小孢子 减数分裂 有丝分裂 花粉管细胞核 生 殖细胞核 萌发 有丝分裂 花粉管 2 个精子 小孢子母细胞花粉母细胞 小孢子 减数分裂 有丝分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 有分丝裂 精子 1个 营养细胞 生殖细胞 4个 4个 4个 4个 4个 8个 （小孢子四分体时期 单核居中期 单核靠边期 双核期） 花粉粒类型 一个成熟的花粉粒即为雄配子体，有两种情况： 成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） 有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 二核花粉粒: 三核花粉粒: 被子植物的雌蕊 二、产生花粉植株的两种途径 快速阅读P38页有哪两种途径？原因是什么？ 花药 胚状体 愈伤组织 丛芽 生根 植株 a b c d e 1．形成原因：主要取决于培养基中 种类及其浓度配比。 2．植株的特点： 植株，植株弱小， 。 激素 单倍体 高度不育 1.为什么胚状体和愈伤组织到丛芽分别称为分化和再分化？ 思 考 2.花粉植株弱小，高度不育，是否就没有利用价值？ 用于单倍体育种技术，可明显缩短育种周期，培育纯合新品种。 胚状体就像种子，有胚芽、胚轴、胚根等结构。胚状体到丛芽就是由原始的分化状态继续生长和分化完成的。 而愈伤组织形成丛芽的过程是从脱分化状态进入再分化形成丛芽的过程。 三、影响花药培养的因素 阅读P38-39思考： 诱导花粉植株能否成功及成功率的高低，主要影响因素是 和 。 培养基的组成使用顺序 脱分化培养基：MS培养基加入2,4-D、KIN、IAA 生芽培养基:MS培养基加入GA、IBA 生根培养基：MS培养基各成分用量减半，添加IAA 顺序：先用脱分化再用生芽培养基然后用生根培养基 培养基的组成 材料的选择 材料的选择：从花药来看，应当选择初花期的花药；从花粉来看，应当选择单核期的花粉；从花蕾来看，当选完全未开放的花蕾。 阅读思考 为什么选择花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素？ 因为花粉的发育过程中，只有某一时期对离体刺激敏感。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，培养成功率最高。一般选择完全未开放的花蕾。 为什么选择单核期以前和以后 的花药接种，不易获得成功？ 因为单核期以前的花药质地幼嫩，极易破碎；单核期以后的花药，花瓣已有些松动，会带来材料消毒的困难。 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，从而给材料的消毒带来困难。 （一）材料的选取: 染色镜检 2. 针对不易着色的花粉细胞核，采用的方法是： 。花粉细胞核被染成 色。 1.确定花粉发育时期的最常用的方法有 。 机理：醋酸洋红为 性染色剂， 易被碱性染料着色染成红色。 四、实验操作 醋酸洋红法 焙花青-铬矾法 蓝黑 碱 染色体 碱性染料不是通常所说的酸碱性，而指染料中着色基团是阴离子/阳离子，若为阳离子则为碱性染料。 （二）材料的消毒 将花蕾用体积分数70%的酒精浸泡约30秒 立即取出后在无菌水清洗 取出后用无菌纸吸干花蕾表面水分 放入0.1% 的氯化汞溶液中2~4分钟 [或1% 的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液] 取出后再用无菌水冲洗2~3次 *