a-淀粉酶的固定化与淀粉溶液的检测.pptVIP

知识结构 二、a-淀粉酶的固定化与淀粉水解作用的检测 一、固定化技术基础知识 一、固定化技术基础知识 固定化技术：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括吸附法、包埋法、化学结合法（将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上）。 包埋法 化学结合法 物理吸附法 细胞多采用包埋法固定 酶更适合采用化学结合和物理吸附法 固定化 反应方式 不管是固相柱还是固相悬浮体，回收后，在一定条件下贮存，还可以利用。 1.使底物溶液通过装有固相酶的柱，柱留出液即为酶催化的产物。 2.有时也可将固相酶或固定化细胞悬浮于底物溶液中，一定时间后溶液即成酶催化的产物。 实验原理 α-淀粉酶 β-淀粉酶 糖化淀粉酶 淀 粉 糊 精 麦 芽 糖 葡 萄 糖 二、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 运用吸附法将α-淀粉酶的固定在石英砂上。一定浓度的淀粉溶液经过固定化的α-淀粉酶催化后，生成糊精，使流出液加入KI-I2指示液后呈红色，表明水解产物糊精生产。 固定化装置—层析柱 实验材料制备 5mmol/L KI-I2溶液 称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml。 a-淀粉酶的固定化 在烧杯中将5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。再加入 5g石英砂，不时搅拌，30分钟后装入层析柱中。 用10倍体积的蒸馏水洗涤此层析柱以除