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实验1、抗血清制备(白蛋白).ppt
实验一、抗血清制备 实验内容 实验室规则 抗原的制备 动物的免疫 血清的分离、鉴定和保存 免疫学实验室规则 1、进入实验室必须穿白大衣,离室时脱下反折,必要 时戴口罩操作。 2、不必要物品勿带入实验室,必要的物品应放在指定 区域。 3、实验室内禁止饮食、抽烟,不得高声谈笑或随意走 动。 4、用过的有菌器材必须放在指定位置,小心处理传染 材料、培养物和污染物。 5、避免任何有菌材料的溅出,如不慎污染工作台、人、 衣服、地面等,应及时报告老师并处理。 6、实验结束后物归原处,用消毒液浸泡、洗手,打扫 卫生的同学清洁和消毒桌面、地面,并将实验器材 送到准备室和消毒间,关闭水电门窗后离开实验室。 实验室意外的紧急处理办法 1、皮肤破损 2、烧伤 3、化学药品腐蚀伤 4、菌液误入口中 5、菌液流洒桌面 6、火警 实验原理 用抗原刺激机体可以产生抗体,抗原的性质、纯度和活性影响其免疫动物后获得的抗体的的特异性和效价。在体外有目的的制备抗原,经初次、再次免疫的过程可以获得高质量的抗体。 试剂及器材 1. 羊毛脂、液体石蜡、卡介苗、苦味酸、小 牛血清 2. 研钵、注射器、洗耳球、吸管、毛滴管、天平、砝码、药匙等 实验步骤 抗原的制备: 1.称取羊毛脂2g ,于研钵中开始研磨。 2.边磨边逐滴加入石蜡油2ml。 3.吸1:10的小牛血清3ml,从中取约1ml来溶解卡介苗。 4.混匀3液后,逐滴加至研钵中,同时不断磨匀至均匀白色,检查呈油包水状态即可。 动物的免疫: 日期 途径 抗原 剂量 9.13 皮内 福氏完全佐剂+Ag 1ml/只 多点注射 (1:10的小牛血清) 9.27 皮内 福氏半佐剂+Ag 1ml/只 多点注射 (1:10的小牛血清) 10.8 耳缘静脉注射 1:5的小牛血清 0.1ml/只 10.10 耳缘静脉注射 1:5的小牛血清 0.3ml/只 10.12 耳缘静脉注射 1:5的小牛血清 0.5ml/只 10.18 采血、鉴定、保存。 注意事项 1. 制备佐剂时,一定要顺着同一方向用劲磨。 2. 检查油包水的方法:培养皿内加水,滴入 混匀液,不散开即可。如果第1次检查不合格,第2次检查必须重新倒水在平皿。 3. 免疫动物皮内注射时,可以在足垫、腋下、 背部等处多点注射,总剂量1ml/只。 * * *
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