第七章包膜区和细胞嗜性的遗传学研究.docVIP

第七章：包膜区和细胞嗜性的遗传学研究 早期的HIV基因组分子研究大体确定了不同病毒基因对感染和复制相对的重要性。病毒的包膜区对细胞嗜性和细胞毒性的影响更是受到关注。这些研究使人们认识到几种调控基因可以影响病毒合成。进一步研究着重在这些病毒基因区如何与细胞因子相互作用引起不同的生物学和血清学特性。本章概述了病毒蛋白与HIV-1和HIV-2感染中诸多特性相关的一些发现。 包膜区和细胞嗜性的遗传学研究 1，概述 最初几篇报道表明包膜区包含了主要的与细胞嗜性(即T细胞嗜性和巨噬细胞嗜性)、细胞毒理学、CD4蛋白调控和病毒中有关基因序列。在所有这些研究和其他在本书引用的研究中，重要的是要认识到，HIV分离株感染(或转染)T细胞系的能力的不同不一定预示着对初始CD4+淋巴细胞感染嗜性的变化。所有的病毒的突变，除了那些缺失了感染能力的突变，如果在具有适当的辅助受体情况下，一般会维持其感染外周血CD4+细胞的能力。 此外，即使不是全部，也是大多数的HIV分离株可以感染巨噬细胞，但复制的程度有所不同。因此，巨噬细胞嗜性主要指的是在巨噬细胞中具有很高滴度的R5病毒。而且，在巨噬细胞和T细胞系中都可以很好复制的HIV毒株可以确定其为双嗜性病毒(R5／X4分离株。已经发现一些病毒只能在CD4，淋巴细胞很好的生长，而不能在巨噬细胞和T细胞系中生长。最后，对初始巨噬细胞的嗜性与被转染的单核细胞系的感染无关。因而，细胞培养研究的结果也许不能正确的反应体内的情况，但是这些结果确实显示了某些特定的基因区以及膜的构造对细胞嗜性的重要性。 目前公认的是特定的细胞辅助受体可以限定细胞的嗜性，以往的一些发现对目前理解巨噬细胞嗜性(R5)或T细胞嗜性(X4)病毒与特定的细胞表面辅助受体之间的相互作用极为重要。例如，V3显示出对CCR-5、CXCR-4有着重要的决定作用。然而，那些使用这一受体的毒株的多样性(HIV-1、HIV-2和SIV不同亚型)提示除这一包膜可变区以外的区域也参与了这一过程。然而，一些研究表明V3环和趋化因子一些决定域具有相似性，这可以解释其共同进入细朐的途径。 2，巨噬细胞嗜性 几年前的一些实验研究大大地缩小了决定巨噬细胞嗜性病毒的基因范围。对源自两个无关的HIV-1毒株的重组病毒毒株(T细胞系嗜性X4 SF2毒株和巨噬细胞嗜性R5SFl62毒株)的研究首先表明，最初对巨噬细胞的感染与gpl20 3端编码的159个氨基酸相关，对另外两个病毒株研究也有类似的发现。随后证明了仅仅是V3环内部(经检验为gpl20的304～324位氨基酸残基)就决定了巨噬细胞嗜性。V3环仅3个氨基酸改变，一个X4毒株就被赋予了巨噬细胞嗜性。然而，把诸如HIV-1SF2这样的X4毒株转变成具有与SFl62相等复制特性的R5毒株，则要求置换。V3环的同时置换V1和V2区。在其他病毒重组体中也有类似发现，V1和V2区对病毒在培养的巨噬细胞中进行有效复制具有重要作用。 在其他的病毒突变研究中，发现HIV-1SF2的V2中，如果去掉两个N-糖基化点，HIV-1SF2毒株则具有了巨噬细胞嗜性而丧失了T细胞系嗜性。这一戏剧性的发现似乎反映了在病毒进入细胞时包膜构象(如表位亲和力)和(或)病毒进入细胞电荷状况的重要性。最后，一些研究表明，大量病毒感染巨噬细胞与两个截然不同的基因区和机制有关：病毒进入的包膜基因，以及与病毒有效复制的vif和vpr基因。 3，T细胞嗜性 V3环对T细胞系嗜性同样重要，上文提到的带有SF-162V3区的SF2重组病毒当获得巨噬细胞嗜性的同时也丧失了T细胞嗜性。另外，用HIV-1SF2个氨基酸替换HIV-1SF162V3环5个氨基酸，并不能使HIV-1SF162重组体表位X4病毒，然而，对于一个SF2突变株(Mu8)，仅V3环单个氨基酸改变就使其丧失对一个特殊T细胞系(MT-4)的感染力，但对其他的T细胞系的感染力则不受影响。 4，V3环 关注于V3环，HIV包膜区顶端(GPGRA)的突变通常导致病毒感染性的丧失，并且检测到在不影响与CD4结合的情况下病毒致细胞融合潜力改变。而且，在一些实验中发现包膜区V3环的电荷量(例如，在11或28位氨基酸带正电荷)与高效的T细胞系病毒感染、合胞体的形成及病毒的复制有关。然而，在另一些实验未能证明具有特定氨基酸的V3环序列与X4病毒有关。此外，有些研究提到在不同亚型HIV-1中在这些分子发现符合方面是不同的，至于HIV-2，也有表明其细胞嗜性与V3环有关的报道。如上所述，V3环在病毒进入细胞过程中的用途可以被膜蛋白上的一些功能域解释，这一点与趋化因子相似。 最后，如第3章所述，除gp120以外其他一些病毒基因区，特别是gp41具有与病毒进入时的附着过程(例如，病毒一细胞融合)有关的膜结构功能区。 5，脑源细胞嗜性 研