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【KS5u原创】2013届高三生物复习课件 动物细胞融合与单克隆抗体
自主阅读,p52第2自然段,思考下列问题 1、什么叫动物细胞融合 cell fusion? (概念要点) 2、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同?两者的融合过程是否也一样? 诱导细胞融合物质: 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 B淋巴细胞与抗体的关系: 2、单克隆抗体McAb(概念) 单克隆抗体的概念 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 抗体: 化学性质单一、特异性强 如何大量生产单克隆抗体? 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 植物组织培养 VS * * 动物细胞融合与单克隆抗体 带者问题走进课堂? ① 两个或多个动物细胞 ② 一个细胞(杂交单核细胞) 诱导剂:灭活病毒、聚乙二醇PEG诱导细胞融合的病毒必须灭活。 思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗? 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭 活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。 制备单克隆抗体 用途 诱导方法 细胞融合的方法 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 3、动物细胞融合技术的发展简史告诉我们:科学技术是不断发展的。那么,实现动物细胞融合有什么意义呢? 打破生殖隔离,使远缘杂交成为可能; 广泛应用多个学科领域; 重要用途:制备单克隆抗体。 1、抗体 1.1 概念: 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白 。 1.2 来源: B淋巴细胞。 1.B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。 2.动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 3.每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 自主阅读P52:传统的抗体的生产方法及 缺陷是什么?怎样解决这个问题? 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点:特异性强、灵敏度高、 纯 度 高、产 量 大。 如何筛选? 融合方式? 生产单克隆抗体需要那些物质和技术呢? 3、单克隆抗体McAb制备过程 专一抗体检验阳性 单克隆抗体 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选,继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 筛选 创始人:米尔斯坦 单克隆抗体制备过程 思考问题: 1、本过程利用了哪些原理? 免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合? 这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体 4、单克隆抗体的应用 与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显。 应用主要有: 1、临床诊断、治疗疾病。 2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤。 课堂小结 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 两个过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法--灭活病毒 一个新细胞--杂交瘤细胞 一个优势--单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 1、动物细胞融合的目的中最重要的是 ( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 2、 动物细胞融合过程中所用的诱导剂——灭活的病毒,抗原性和感染力的有无是 ( ) A.失去抗原性,具有感染力 B.具有抗原性,也具有感染力 C.失去抗原性,也失去感染力 D.具有抗原性,失去感染力 B D 3、单克隆抗体是指( ) A.单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B.单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C.单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体 D.单个抗体通过克隆化,产生大量抗体 4、生产单克隆抗体时,在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞,因为该试剂( ) A.能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制 B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C.选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 D.能阻止
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