血清生化物质测定步骤.docVIP

血糖测定方法（邻甲苯胺法） 一、原理：葡萄糖为一含醛基的己糖，在酸性与加热情况下脱水反应生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛，再与邻甲苯胺缩合成芳香族第一级胺青色的席弗氏碱。 二、试剂： 1、邻甲苯胺试剂：取冰醋酸920ml，加入硫脲（Thiourea）1.5g，待其溶解，加邻甲苯胺（o-Toluidine）80ml，充分混合后，取此液960ml加入饱和硼酸溶液40ml，混匀，放置于棕色瓶中。 2、饱和硼酸溶液：称取硼酸6g，以蒸馏水溶解并稀释至100ml，放置一夜，过滤即可应用。 3、葡萄糖贮存标准液（1ml=5mg）：将少量无水葡萄糖，CP置于硫酸干燥器内一夜。精确称取此葡萄糖500mg，以饱和苯甲酸溶液溶解并转移入100ml容量瓶内，以饱和苯甲酸溶液加至刻度。此液可长期保存。 4、葡萄糖应用标准液（1ml=0.05mg）：取葡萄糖贮存标准液1ml置于100ml容量瓶内，加入饱和苯甲酸溶液至刻度。 5、饱和苯甲酸溶液：称取苯甲酸（Benzoicacid）2.5g，于800ml蒸馏水中，加热溶解，冷却后加蒸馏水至1000ml。 三、操作： 步骤 管别 测定管 标准管 空白管 血清（ml） 0.1 葡萄糖应用标准液（ml） 0.1 蒸馏水（ml） 0.1 邻甲苯胺试剂（ml） 5.0 5.0 5.0 放沸水煮沸8min，冷水冷却，用640nm或红色滤光板光电比色，